收稿日期: 2002209202 修回日期: 2002212220

    基金项目: 浙江省医药卫生科学研究基金(2000A 069).

    作者简介: 万双林(1967- ) , 男, 博士, 副主任医师, 从事骨肿

    瘤的基础和临床研究.

    顺铂热化疗对骨肉瘤细胞株细胞毒性的实验研究

    万双林1

    , 张 剑1

    , 杨迪生2

    , 范顺武1

    (1. 浙江大学医学院 附属邵逸夫医院, 浙江 杭州 310016; 2. 浙江大学医学院 附属第二医院, 浙江 杭州 310009)

    [摘 要] 目的: 研究顺铂热化疗对骨肉瘤细胞株(O S2732)细胞毒性的影响, 探讨热疗在骨肉瘤顺铂化疗中增效

    作用的机理。方法:O S2732 细胞株分别经不同温度的热疗、不同浓度顺铂化疗、 43℃热疗+ 顺铂联合作用各1 h, 采

    用体外细胞毒性试验(M TT 法)、流式细胞仪(FCM )分析及电子显微镜观察其对细胞毒性和细胞周期的影响, 以及

    诱导细胞凋亡的情况。结果: 41℃、 43℃、 45℃热疗对O S2732 细胞株有明显的细胞毒性作用。在 37℃恒温条件下,细胞株单独与不同浓度的顺铂作用 1 h, 随着顺铂浓度的升高, 其细胞毒性作用明显增加。43℃热疗+ 顺铂共同作

    用 1 h, 其细胞毒性作用进一步增加, 细胞毒性指数最高达 72137%; FCM 分析显示对细胞周期有明显的影响, S 期

    细胞比例明显增加, G2 与M 期细胞比例明显减少。43℃热疗、 43℃热疗+ 顺铂联合作用各 1 h 均出现凋亡细胞峰

    (亚G1 峰) , 细胞凋亡比例最高达 56147%; 透射电镜观察有典型的细胞凋亡特征性变化。结论: 顺铂热化疗有明显

    的增强O S2732 细胞株的细胞毒性作用。43℃热疗、 43℃热疗+ 顺铂均可诱导骨肉瘤细胞凋亡。43℃热疗诱导骨肉

    瘤细胞凋亡可能是热疗在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的潜在机制之一。

    [关键词] 骨肉瘤? 药物作用; 顺铂? 治疗应用; 高温, 诱发; 肿瘤细胞, 培养的

    [中图分类号] R 738. 1 [文献标识码] A [文章编号] 100829292 (2003) 0520427206

    Cytotox ic ef fect of thermo-chemotherapy with c ispla t in on osteosarcoma OS-732 cell l ine

    WAN Shuang2lin, ZHAN G J ian, YAN G D i2sheng, et al (T he S ir R un R un S haw H osp ital, Col leg e of M ed icine,Z hej iang U niversity , H ang z hou 310016, Ch ina)

    [Abstract ] Object ive: To observe the cyto toxic effect of thermo2 chemo therapy w ith cisp lat in on o steo sarcoma

    O S2732 cell line and to exp lo re itsmechanism. Methods : The o steo sarcoma O S2732 cell line w as t reated w ith dif2

    ferent temperature, cisp lat in alone and 43℃+ cisp lat in fo r 1 h, respect ively and the in v itro cyto toxic effect w as

    observed w ithM TT assay . The cell cycle and the apop to t ic rate w ere analyzed w ith f low cytomet ry (FCM ) ; the

    cellular apop to sis w as observed also w ith elect ron m icro scope . Results: The cyto toxicity index increase markedly

    as the temperature elevated o r the concent rat ion of cisp lat in increased . W h ile t reated w ith 43℃ hyper therm ia and

    cisp lat in simultaneously, the cyto toxicity index increased to 72137%; the cell cycle of the t reated O S2732 cells line

    w as changedw ith marked increase in S phase and decreasing in G2? M phase . The apop to t ic rate increasedmarkedly

    w ith the h ighest of 56147%. Elect ron m icro scope show ed the character ist ic apop to t ic alterat ions . Conclus ion: Hy2

    per therm ia w ith cisp lat in enhance cyto toxicity on o steo sarcoma O S2732 cell line and the induced cell apop to sismay

    be one of the mechanism s of enhanced cyto toxicity by thermo2 chemo therapy .

    [Key words ] O steo sarcoma? drug eff; Cisp lat in? ther use; Hyper therm ia, induced; Tumo r cells, cultured

    [ J Zhejiang U niv (M edical Sci) , 2003, 32 (5) : 427- 432. ]

    热化疗是新近出现的一种综合疗法, 高温

    隔离灌注化疗作为骨肉瘤新辅助化疗的一部

    分, 在控制肿瘤原发灶、提高保肢成功率等方面

    已取得了肯定的效果, 但有关的实验报道甚少。

    第32 卷 第 5 期 2003 年 浙 江 大 学 学 报 ( 医 学 版 )

    JOURNAL OF ZHEJ IAN G UN IV ERS ITY (M ED ICAL SC IENCES)

    Vo l 32 No 5

    2003

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.如何增强骨肉瘤的化疗效果, 如何提高骨肉瘤

    患者的无瘤生存率是目前亟待解决的问题。为

    了验证顺铂热化疗的确切效果, 本实验采用 32

    ( 4, 52 dim ethylth iazo l222 yl ) 22, 52 diphenylte2

    t razo lium b rom ide (M TT ) 体外细胞毒性试验

    观察顺铂热化疗对骨肉瘤细胞株(O S2732)的

    细胞毒性作用, 为临床应用提供实验依据。

    1 材料与方法

    1 . 1 材料 人O S2732 细胞株购于北京积水

    潭医院创伤骨科研究所, RPM I21640 干粉、胰

    酶均购自美国Gibco 公司,M TT 购自美国Sig2

    m a 公司, 顺铂购自山东齐鲁制药厂, 新生小牛

    血清购自杭州四季青生物制品厂, 96 孔板、加

    样器均购自美国 Gibco 公司, 恒温水浴箱为上

    海医用恒温设备厂产品, 流式细胞仪(FCM )为

    FAC Scan 美国Becton D ick in son 公司产品, 电

    子显微镜为荷兰Ph ilip s TECNA I产品 ......