双氢_____双氢青蒿素；CpG(论著)

双氢青蒿素对CpG ODN诱导小鼠RAW264.7细胞释放细胞因子的影响

http://www.100md.com 《四川生理科学杂志》 2005年第4期

双氢,,双氢青蒿素；CpG,ODN；LPS；热灭活EC；细胞因子,双氢青蒿素对CpGODN诱导小鼠RAW264.7细胞释放细胞因子的影响,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献

     摘要目的：观察双氢青蒿素对CpG ODN诱导小鼠RAW264.7细胞释放细胞因子的影响。方法：体外培养小鼠RAW264.7细胞，用CpG ODN刺激小鼠RAW264.7细胞分泌TNFα、IL6，用不同浓度双氢青蒿素进行拮抗，ELISA法检测培养上清中促炎细胞因子的含量。结果：双氢青蒿素可抑制CpG ODN刺激小鼠RAW264.7细胞释放TNFα和IL6，并呈一定的量效关系，其中对IL6最大抑制率可达到66.5%，而对TNFα释放的最大抑制率仅为7.2 %，其影响细胞因子释放的作用与细胞毒作用无关。结论：双氢青蒿素呈浓度依赖性地抑制CpG ODN刺激小鼠RAW264.7细胞释放TNFα和IL6，但对TNFα的影响较小。

    关键词双氢青蒿素；CpG ODN；LPS；热灭活EC；细胞因子

    双氢青蒿素(dihydroartemisinin , DHA)是中草药青蒿的提取物青蒿素及其衍生物在体内的代谢产物和有效成份。本实验室近期的研究发现，青蒿素可明显降低多种致炎因素诱导的RAW264.7细胞TNF 和IL6释放，对致死剂量CpG DNA[1]、LPS和灭活大肠杆菌攻击小鼠的有明显保护作用。另有文献报道，双氢青蒿素可明显降低卡氏肺孢子虫肺炎大鼠肺泡巨噬细胞产生TNFα水平[2]，对BXSB狼疮小鼠血清中TNFα的分泌也有抑制作用[3]，以上均提示DHA可能也有类似于青蒿素的作用。本实验旨在观察DHA对CpG ODN诱导小鼠RAW 264.7细胞释放细胞因子的影响，从而为青蒿素类衍生物是否对细菌攻击小鼠的也具有保护作用以及能否用于临床脓毒症的治疗提供进一步的理论依据。

     1 材料与方法

    1.1 材料双氢青蒿素(DHA，购自重庆涪陵山制药有限公司，以少量二甲基亚砜(DMSO)溶解配成母液，超声助溶，4℃保存；实验前用培养基稀释至所需浓度(DMSO 终浓度小于0.5 %)；小鼠巨噬细胞系RAW264.7(购自美国ATCC公司)；全硫代修饰CpG ODN 1826(上海博亚生物技术有限公司合成，序列为5'TCCATGACGTTCCTGACGTT3')；小鼠TNFα、IL6 ELISA检测试剂盒(上海晶美生物工程有限公司)；低内毒素胎牛血清(美国PAA公司)；鲎试剂和内毒素检查用水购于广东湛江安度斯生物有限公司；实验用移液管、吸管等玻璃器材均经250℃高温3 h去热原处理；培养板、离心管购自美国BD公司，无热原，一次性使用；其他塑料器材均辐照去热原。

    1.2 实验方法 ......

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