供者淋巴细胞输注治疗小鼠H22肝癌的实验研究
淋巴,,],肝癌;供者淋巴细胞输注;移植物抗肿瘤效应;免疫治疗;小鼠,1材料与方法,2结果,3讨论,[参考文献]
[摘要]目的: 观察供者淋巴细胞输注(DLI)对小鼠H22肝癌的治疗作用。 方法: 荷瘤昆明小鼠分荷瘤对照组(A组)、5.氟脲嘧啶(5.FU)化疗组(B组)、DLI组(C组)及5.FU加DLI组(D组)4组。比较各组小鼠生存期、抑瘤率及瘤体病理检查结果,检测NK细胞及IL.2的活性。 结果: B、C组生存时间长于A组(P<0.01),D组长于C组(P<0.01);B、C、D各组抑瘤率依次为61.3%、34.7%、89.5%;C、D两组NK细胞及IL.2活性明显高于A、B组(P<0.05);病理观察见C、D组大量炎性细胞浸润。 结论: DLI对小鼠H22肝癌有治疗作用,是一种潜在可行的实体瘤细胞过继免疫治疗方法。[关键词] 肝癌;供者淋巴细胞输注;移植物抗肿瘤效应;免疫治疗;小鼠
随着现代生物技术的发展,生物治疗已逐渐成为治疗肿瘤的重要手段之一。目前LAK细胞、TIL细胞、TAK细胞等过继性细胞免疫疗法都是给患者回输其自身的淋巴细胞。本研究通过向荷瘤小鼠体内输注正常的供者淋巴细胞,诱导特有的异体抗肿瘤反应来攻击肿瘤,探索一种新的实体瘤过继免疫治疗方法。
1 材料与方法
1.1 动物
BALB.C小鼠、KM小鼠,雌性,均为8~10周龄,体重18~22g,由东南大学医学院实验动物中心提供。
1.2 试剂
环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)为江苏恒瑞医药股份有限公司产品;5.氟脲嘧啶(5.FU)为天津金耀氨基酸有限公司产品。
1.3 实体型荷瘤鼠模型建立
无菌操作取传代8d的H22小鼠腹水,台盼蓝染色,活瘤细胞超过90%,调细胞浓度为1×10 7 ml -1 ,分别取0.2ml接种于KM小鼠右侧腋下皮下,接种后第3天可触及肿瘤结节。
1.4 实验分组
共分4组,每组10只(另备3只中途处死)。A组(荷瘤对照组):不作任何处理;B组(5.FU化疗组):接种后第3天开始化疗,5.FU20mg·kg -1 腹腔注射,连续用药7d;C组[供者淋巴细胞输注(donor lymphocyte in-fusion,DLI)组]:接种前11d经脾细胞加CP加供体脾细胞输注的方法[1] 诱导对BALB.C小鼠的特异性免疫耐受状态 ......
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