重组腺病毒pAd-BMP7转染大鼠骨髓MSCs及骨向分化的研究
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目的 本研究旨在观察骨形成蛋白-7(BMP-7)重组腺病毒对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化的影响，并检测BMP-7在MSCs中的表达。方法 测定重组腺病毒pAd-BMP7的滴度。将MSCs分成实验和对照2组，分别转染pAd-BMP7和空白载体pAdTrack-CMV，检测外源基因转染效率，并在骨向诱导下观察细胞矿化结节形成情况。应用RT-PCR、免疫细胞化学手段进一步检测BMP-7在MSCs中的表达。结果 重组腺病毒pAd-BMP7的滴度可达2.0×1012 pfu/ml；外源基因的转染效率接近100%，表达时间持续5~7周，3周内表达水平较高。转染BMP-7的实验组体外矿化结节形成早于对照组，结节的数目和体积均较对照多。RT-PCR和免疫细胞化学检测证实了BMP-7在大鼠MSCs中的有效表达。 结论 本研究结果提示BMP-7重组腺病毒可有效转染大鼠骨髓MSCs，并促进其骨向分化；转染的BMP-7得到了有效表达。本研究采用的基因工程策略为颅颌面骨缺损的修复提供了一个有价值的手段。
目的 本研究旨在观察骨形成蛋白-7(BMP-7)重组腺病毒对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化的影响，并检测BMP-7在MSCs中的表达。方法 测定重组腺病毒pAd-BMP7的滴度。将MSCs分成实验和对照2组，分别转染pAd-BMP7和空白载体pAdTrack-CMV，检测外源基因转染效率，并在骨向诱导下观察细胞矿化结节形成情况。应用RT-PCR、免疫细胞化学手段进一步检测BMP-7在MSCs中的表达。结果 重组腺病毒pAd-BMP7的滴度可达2.0×1012 pfu/ml；外源基因的转染效率接近100%，表达时间持续5~7周，3周内表达水平较高。转染BMP-7的实验组体外矿化结节形成早于对照组，结节的数目和体积均较对照多。RT-PCR和免疫细胞化学检测证实了BMP-7在大鼠MSCs中的有效表达。 结论 本研究结果提示BMP-7重组腺病毒可有效转染大鼠骨髓MSCs，并促进其骨向分化；转染的BMP-7得到了有效表达。本研究采用的基因工程策略为颅颌面骨缺损的修复提供了一个有价值的手段。
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