腹膜间皮细胞PPARγ的表达及其配体对CD40和ICAM-I的影响
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目的 观察过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)在大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)中的表达以及LPS的调节作用，并探讨PPARγ天然配体15d-PGJ2及人工合成配体Ciglitazone对RPMCs表达CD40和ICAM-I的影响。方法 分离、培养RPMCs，常规传代及鉴定，取第二代细胞用于实验研究。LPS不同浓度(0.1µg/ml，1.0µg/ml，10µg/ml，50µg/ml，100µg/ml)、LPS(1μg/ml )处理后不同时间点及15d-PGJ2(3μmol/L)、Ciglitazone(10μmol/L)作用于细胞36h后收集细胞。RT-PCR检测PPARγ、CD40以及ICAM-I mRNA表达；免疫细胞化学检测PPARγ在RPMCs中的分布；Western 印迹检测PPARγ及ICAM-I蛋白表达。结果 (1)常规培养的RPMCs表达一定量PPARγ，表达部位主要分布于RPMCs细胞核内，细胞浆微弱表达；(2)随着LPS浓度逐渐增大，PPARγ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势，LPS浓度为10µg/ml时其表达为最高峰。LPS (1μg/ml)作用12h PPARγ蛋白表达最强，PPARγ1表达高于PPARγ2；之后显著降低，持续至72h。(3)LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强；15d-PGJ2、Ciglitazone显著降低CD40mRNA表达(P均
目的 观察过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)在大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)中的表达以及LPS的调节作用，并探讨PPARγ天然配体15d-PGJ2及人工合成配体Ciglitazone对RPMCs表达CD40和ICAM-I的影响。方法 分离、培养RPMCs，常规传代及鉴定，取第二代细胞用于实验研究。LPS不同浓度(0.1µg/ml，1.0µg/ml，10µg/ml，50µg/ml，100µg/ml)、LPS(1μg/ml )处理后不同时间点及15d-PGJ2(3μmol/L)、Ciglitazone(10μmol/L)作用于细胞36h后收集细胞。RT-PCR检测PPARγ、CD40以及ICAM-I mRNA表达；免疫细胞化学检测PPARγ在RPMCs中的分布；Western 印迹检测PPARγ及ICAM-I蛋白表达。结果 (1)常规培养的RPMCs表达一定量PPARγ，表达部位主要分布于RPMCs细胞核内，细胞浆微弱表达；(2)随着LPS浓度逐渐增大，PPARγ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势，LPS浓度为10µg/ml时其表达为最高峰。LPS (1μg/ml)作用12h PPARγ蛋白表达最强，PPARγ1表达高于PPARγ2；之后显著降低，持续至72h。(3)LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强；15d-PGJ2、Ciglitazone显著降低CD40mRNA表达(P均
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