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编号:10970783
牛PrPc结构蛋白基因亚克隆及原核表达
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    参见附件。

     目的 制备PrPc重组结构蛋白,为研究与人和动物海绵状脑病发病有关的膜蛋白PrPc的生物学功用提供试验材料。方法 采用PCR扩增并克隆奶牛PrPc基因,经DNA序列分析后, 亚克隆至PET30a(+)表达质粒,优化条件进行目的蛋白表达。结果 PrPc基因序列与已发表的标准PrP基因序列相同。在蛋白原核表达系统中,标准PrPc基因可有效地表达完整的PrPc蛋白。Western blotting蛋白转印试验证实, 所表达的蛋白具有良好的免疫反应性。 结论 牛PrPc基因能在大肠杆菌蛋白表达系统中得到有效地表达。

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