高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞GLUT4、P21表达
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目的 探讨高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞(GMC)GLUT4、P21表达及细胞骨架蛋白F-actin 的影响，进一步研究上述因子在糖尿病肾病发生发展中的重要作用。方法 将培养的鼠1097系膜细胞分为8组：正常对照组，生理浓度胰岛素组(10-9M)，低浓度胰岛素组(10-8M)，高浓度胰岛素组(10-6M)，高糖组(30mM)，甘露醇组，高糖加高浓度胰岛素组，高糖加生理浓度胰岛素组。采用RT-PCR法检测GLUT4 mRNA、P21 mRNA含量， rhodamine-phalloidin染色，激光共聚焦显微镜观察F-actin形态并测定荧光强度。流式细胞仪测各组GMC大小。结果 1、正常系膜细胞可检测到GLUT4 mRNA、P21 mRNA。2、高糖组GLUT4 mRNA表达明显下降，P21mRNA表达明显增加；不同浓度胰岛素刺激GMC中GLUT4 mRNA表达存在浓度—效应关系；P21mRNA表达越高，细胞前向角度散射光(FSC)越强，GMC体积越大。3、高糖组F-actin荧光强度明显下降，不同浓度胰岛素与F-actin荧光强度存在浓度-效应关系。4、GLUT4 mRNA表达与F-actin荧光强度变化呈同向关系，相关系数为0.786(p
目的 探讨高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞(GMC)GLUT4、P21表达及细胞骨架蛋白F-actin 的影响，进一步研究上述因子在糖尿病肾病发生发展中的重要作用。方法 将培养的鼠1097系膜细胞分为8组：正常对照组，生理浓度胰岛素组(10-9M)，低浓度胰岛素组(10-8M)，高浓度胰岛素组(10-6M)，高糖组(30mM)，甘露醇组，高糖加高浓度胰岛素组，高糖加生理浓度胰岛素组。采用RT-PCR法检测GLUT4 mRNA、P21 mRNA含量， rhodamine-phalloidin染色，激光共聚焦显微镜观察F-actin形态并测定荧光强度。流式细胞仪测各组GMC大小。结果 1、正常系膜细胞可检测到GLUT4 mRNA、P21 mRNA。2、高糖组GLUT4 mRNA表达明显下降，P21mRNA表达明显增加；不同浓度胰岛素刺激GMC中GLUT4 mRNA表达存在浓度—效应关系；P21mRNA表达越高，细胞前向角度散射光(FSC)越强，GMC体积越大。3、高糖组F-actin荧光强度明显下降，不同浓度胰岛素与F-actin荧光强度存在浓度-效应关系。4、GLUT4 mRNA表达与F-actin荧光强度变化呈同向关系，相关系数为0.786(p
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