狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞PPARγ表达及CD40、RANTES的影响
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观察狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及INFγ和TNFα诱导的CD40和RANTES 表达的影响,探讨该复方体外抗炎效应及其可能机制。方法:正常雄性Wistar 大鼠狼疮方煎剂灌胃7天,制备含药血清;对照组给予等容积生理盐水。HK-2细胞株在含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,37℃、5%CO2的条件下培养,细胞生长至70-80%时换无血清DMEM/F12培养基培养24h,其后分组如下:(1)培养基对照组;(2)正常鼠血清对照组;(3)狼疮方含药血清组;(4)IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)刺激组;(3)IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)+10%狼疮方血清对照组;(4)IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)加10%正常鼠血清对照组。采用Western-blot检测PPARγ的蛋白表达,半定量多聚酶链反应(RT-PCR)检测CD40mRNA、RANTES mRNA的表达水平。 结果 (1)正常的HK-2细胞中,PPARγ有基础量表达,10%的狼疮方含药血清作用下,PPARγ蛋白表达呈现时间依赖性先增高后降低的趋势。(2)正常HK-2细胞中,CD40、RANTES 有基础水平表达。在IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)刺激后,CD40mRNA和RANTES mRNA表达显著升高,10%的狼疮方含药血清可以显著抑制IFNγ+TNFα诱导的CD40和RANTES的表达;正常鼠对照血清对CD40mRNA和RANTES mRNA表达无明显影响。结论:狼疮方含药血清可能通过激活PPARγ途径抑制IFNγ和TNFα诱导的人近端肾小管上皮细胞CD40和RANTES的表达,从而发挥抗炎效应
观察狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及INFγ和TNFα诱导的CD40和RANTES 表达的影响,探讨该复方体外抗炎效应及其可能机制。方法:正常雄性Wistar 大鼠狼疮方煎剂灌胃7天,制备含药血清;对照组给予等容积生理盐水。HK-2细胞株在含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,37℃、5%CO2的条件下培养,细胞生长至70-80%时换无血清DMEM/F12培养基培养24h,其后分组如下:(1)培养基对照组;(2)正常鼠血清对照组;(3)狼疮方含药血清组;(4)IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)刺激组;(3)IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)+10%狼疮方血清对照组;(4)IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)加10%正常鼠血清对照组。采用Western-blot检测PPARγ的蛋白表达,半定量多聚酶链反应(RT-PCR)检测CD40mRNA、RANTES mRNA的表达水平。 结果 (1)正常的HK-2细胞中,PPARγ有基础量表达,10%的狼疮方含药血清作用下,PPARγ蛋白表达呈现时间依赖性先增高后降低的趋势。(2)正常HK-2细胞中,CD40、RANTES 有基础水平表达。在IFNγ(50μg/ml)+TNFα(10ng/ml)刺激后,CD40mRNA和RANTES mRNA表达显著升高,10%的狼疮方含药血清可以显著抑制IFNγ+TNFα诱导的CD40和RANTES的表达;正常鼠对照血清对CD40mRNA和RANTES mRNA表达无明显影响。结论:狼疮方含药血清可能通过激活PPARγ途径抑制IFNγ和TNFα诱导的人近端肾小管上皮细胞CD40和RANTES的表达,从而发挥抗炎效应
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