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编号:10970757
RP-HPLC测定羟基喜树碱脂质体在肿瘤细胞内的聚积
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     抗肿瘤药物的细胞内聚积量在很大程度上影响着癌症的化疗效果,基于此本研究建立了一种简单、灵敏的RP-HPLC用来测定人食管癌Eca109 细胞内羟基喜树碱(HCPT)的含量。细胞与HCPT脂质体共同孵育一定时间后,收集细胞冰浴超声裂解。细胞裂解液用乙酸乙酯提取后采用RP-HCPT测定细胞内HCPT含量。流动相由0.1%三乙胺-磷酸缓冲液和乙腈((75:25, v/v,pH 3.0)组成。荧光检测器波长λex = 382 nm , λem = 528 nm;线性范围为2—100 ng/ml,r=0.9999,定量限为2ng/ml;提取率回收率为89.76%,日内差和日间差变异系数均小于10%。运用该方法分别检测HCPT注射液和HCPT脂质体与细胞共同孵育后细胞内HCPT含量,结果显示,在不同的孵育时间点与HCPT脂质体孵育过的细胞内HCPT含量高于HCPT注射液孵育过的细胞。

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