RegIV基因在结直肠癌细胞系中的mRNA表达及pcDNA-RegIV的构建与转染
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目的 探讨RegIV基因在四种结直肠癌细胞系中的表达水平,构建并转染pcDNA-RegIV重组质粒,为阐明RegIV基因在结直肠癌发生发展中的作用机制奠定基础;方法 采用RT-PCR方法检测HT-29、CaCo2、Sw480、LoVo细胞系的RegIV基因的表达水平,将获得目的基因RegIV克隆于pcDNA3.1¤(-)质粒上,用PCR、酶切进行鉴定后,脂质体转染至低表达甚至不表达RegIV的结直癌细胞系,用G418筛选后进行RT-PCR鉴定;结果 HT-29、CaCo2细胞系RegIV基因高表达,Sw480细胞系表达较前两者弱,LoVo细胞系RegIV阴性表达;构建的重组质粒中含有RegIV基因,经pcDNA-RegIV转染的LoVo细胞RegIV基因呈阳性表达;结论 RegIV基因在不同的结直肠癌细胞系中表达水平不同,成功构建和转染了pcDNA-RegIV可使得RegIV(-)的LoVo细胞系RegIV基因呈阳性表达。
目的 探讨RegIV基因在四种结直肠癌细胞系中的表达水平,构建并转染pcDNA-RegIV重组质粒,为阐明RegIV基因在结直肠癌发生发展中的作用机制奠定基础;方法 采用RT-PCR方法检测HT-29、CaCo2、Sw480、LoVo细胞系的RegIV基因的表达水平,将获得目的基因RegIV克隆于pcDNA3.1¤(-)质粒上,用PCR、酶切进行鉴定后,脂质体转染至低表达甚至不表达RegIV的结直癌细胞系,用G418筛选后进行RT-PCR鉴定;结果 HT-29、CaCo2细胞系RegIV基因高表达,Sw480细胞系表达较前两者弱,LoVo细胞系RegIV阴性表达;构建的重组质粒中含有RegIV基因,经pcDNA-RegIV转染的LoVo细胞RegIV基因呈阳性表达;结论 RegIV基因在不同的结直肠癌细胞系中表达水平不同,成功构建和转染了pcDNA-RegIV可使得RegIV(-)的LoVo细胞系RegIV基因呈阳性表达。
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