siRNA表达载体与阳离子脂质体复合物转染HepG2.2.15细胞实验研究
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目的 观察针对HBV X的siRNA表达载体pGenesil-HBV X与阳离子脂质体的复合物对HepG2.2.15细胞转染效果及其对HBVM表达的影响。 方法 以pGenesil-siAFP表达载体和非转染细胞分别作非特异性序列对照组和空白对照组，用不同配比浓度pGenesil-HBV X与阳离子脂质体的复合物转染HepG2.2.15细胞，荧光显微镜下观察并计算转染阳性细胞百分率，筛选出最佳转染效率的剂量配比。于转染后24、48、72小时采用时间分辨荧光免疫测定技术(TRFIA)检测上清液中HBsAg和HbeAg。结果 pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物8μl：2.5μg剂量配比组的平均转染率达到了55.1±4.3%，且不影响细胞活性；转染后48小时和72小时后该siRNA表达载体对HepG2.2.15细胞表达HBsAg和HbeAg抑制作用显著(P<0.05)；结论 8μl：2.5μg剂量配比组的pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物是最佳的转染剂量配比，能有效抑制HepG2.2.15细胞表达HBsAg和HbeAg。
目的 观察针对HBV X的siRNA表达载体pGenesil-HBV X与阳离子脂质体的复合物对HepG2.2.15细胞转染效果及其对HBVM表达的影响。 方法 以pGenesil-siAFP表达载体和非转染细胞分别作非特异性序列对照组和空白对照组，用不同配比浓度pGenesil-HBV X与阳离子脂质体的复合物转染HepG2.2.15细胞，荧光显微镜下观察并计算转染阳性细胞百分率，筛选出最佳转染效率的剂量配比。于转染后24、48、72小时采用时间分辨荧光免疫测定技术(TRFIA)检测上清液中HBsAg和HbeAg。结果 pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物8μl：2.5μg剂量配比组的平均转染率达到了55.1±4.3%，且不影响细胞活性；转染后48小时和72小时后该siRNA表达载体对HepG2.2.15细胞表达HBsAg和HbeAg抑制作用显著(P<0.05)；结论 8μl：2.5μg剂量配比组的pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物是最佳的转染剂量配比，能有效抑制HepG2.2.15细胞表达HBsAg和HbeAg。
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