活化Notch1信号对人舌鳞癌细胞生长的影响及作用机制的研究
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目的 构建重组逆转录病毒表达载体pCLNRX-ICN，研究过度活化Notch1信号对人舌鳞癌细胞系Tca8113生长的影响，并对其作用机制进行探讨。方法 将人Notch1基因胞内区(intracellular domain of Notch,ICN)克隆至逆转录病毒表达载体pCLNRX中，采用lipofectamineTM 2000将pCLNRX-ICN与包装载体pCL-10A1共转染293T细胞，制备重组病毒上清，检测病毒滴度。通过逆转录病毒感染，将ICN基因导入并整合到人舌癌细胞Tca8113细胞的基因组中,使Notch1信号在细胞中过度活化。MTT法检测稳定表达Notch1(ICN)对Tca8113人舌癌细胞生长的影响， Western blot检测Notch1和细胞周期蛋白激酶(cyclin dependent kinase ,CDK) 抑制因子p21WAF1/CIP1的变化。 结果 成功构建重组逆转录病毒载体pCLNRX-ICN，通过共转染可获得具有较高滴度的重组逆转录病毒。过度活化Notch1信号可以抑制人舌癌细胞Tca8113的生长，并上调CDK抑制因子p21WAF1/CIP1蛋白的表达水平。 结论 过度活化Notch1信号可部分通过上调CDK抑制因子p21WAF1/CIP1蛋白的表达水平而抑制人舌癌细胞生长。
目的 构建重组逆转录病毒表达载体pCLNRX-ICN，研究过度活化Notch1信号对人舌鳞癌细胞系Tca8113生长的影响，并对其作用机制进行探讨。方法 将人Notch1基因胞内区(intracellular domain of Notch,ICN)克隆至逆转录病毒表达载体pCLNRX中，采用lipofectamineTM 2000将pCLNRX-ICN与包装载体pCL-10A1共转染293T细胞，制备重组病毒上清，检测病毒滴度。通过逆转录病毒感染，将ICN基因导入并整合到人舌癌细胞Tca8113细胞的基因组中,使Notch1信号在细胞中过度活化。MTT法检测稳定表达Notch1(ICN)对Tca8113人舌癌细胞生长的影响， Western blot检测Notch1和细胞周期蛋白激酶(cyclin dependent kinase ,CDK) 抑制因子p21WAF1/CIP1的变化。 结果 成功构建重组逆转录病毒载体pCLNRX-ICN，通过共转染可获得具有较高滴度的重组逆转录病毒。过度活化Notch1信号可以抑制人舌癌细胞Tca8113的生长，并上调CDK抑制因子p21WAF1/CIP1蛋白的表达水平。 结论 过度活化Notch1信号可部分通过上调CDK抑制因子p21WAF1/CIP1蛋白的表达水平而抑制人舌癌细胞生长。
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