[摘要]目的: 在大肠杆菌中克隆和表达人快速收缩骨骼肌肌钙蛋白I(troponinⅠ，TnⅠ)，建立一种TnⅠ快速复性方法。 方法: 通过PCR方法将人TnⅠ基因克隆在大肠杆菌表达质粒pET28a中，经过PCR和DNA序列测定验证，并通过IPTG诱导表达。 结果: 通过PCR和DNA核酸序列分析，证实获得的基因片段为TnⅠ全编码序列，TnⅠ被克隆在大肠杆菌表达质粒pET28a中，重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导获得表达，表达水平为占菌体总蛋白的40%，TnⅠ包涵体产物经过对1mmol·L -1 透析复性，获得了抑制血管新生的生物活性。 结论: 构建了TnⅠ表达菌株，经诱导获得TnⅠ的高效表达，建立了简易的TnⅠ体外复性方法，为TnⅠ的深入研究和应用奠定了坚实的基础。

    [关键词] 肌，骨骼;肌钙蛋白Ⅰ.生物合成;大肠杆菌;克隆，分子;复性方法;新生血管化，病理性

    肌钙蛋白(Troponin)包括3个亚基:肌钙蛋白C、I和T。肌钙蛋白I(troponinⅠ，TnⅠ)是含182个氨基酸的蛋白，它能够抑制肌动球蛋白的ATPase活性。1999年，Moses等 [1] 首先在软骨中发现一种蛋白质具有抑制bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)刺激的毛细血管内皮细胞增殖的活性，并证明该蛋白质为人快速收缩骨骼肌TnⅠ。进一步的研究表明，人快速收缩骨骼肌TnⅠ具有抑制血管生成和肿瘤转移的生物活性 [1] ，其作用机理可能是通过和bFGF竞争bFGF受体而发挥作用 [2] 。TnⅠ具有抑制血管新生和肿瘤转移的生物活性，因此在肿瘤和其它血管生成相关疾病的治疗上显现出良好的应用前景。

    作为一个具有药物开发前景的蛋白质，建立高效的人源快速收缩骨骼肌生产方法是其走向应用的一个基本前提。本研究旨在构建一个重组TnⅠ的高效表达菌株，并建立一种简易的TnⅠ体外复性方法 ......