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编号:10971916
扬州地方株HPV16L1基因的克隆及序列分析
http://www.100md.com 《东南大学学报(医学版)》 2005年第1期
基因,,],宫颈肿瘤.病毒学;乳头状瘤病毒,人.遗传学;序列分析;江苏,1材料和方法,2结果,3讨论,[参考文献]
     [摘要]目的: 了解扬州地方株HPV16L1基因结构特点,为研制HPV16疫苗奠定基础。 方法: 从感染HPV16的宫颈癌组织中提取DNA,用PCR技术获得HPV16L1基因,以pGEM.Teasy为克隆载体构建重组质粒pGEM.T.L1,进行限制性核酸内切酶及核苷酸序列分析。 结果: 扬州地方株与德国标准株在核苷酸序列上有7处不同,其中4处由于核苷酸的改变,其编码氨基酸也相应发生变化,与标准株的同源性为99.7%;扬州地方株与中国株之间也存在1至2处核苷酸不同,但未造成氨基酸序列改变,其同源性为99.9%。 结论: 扬州地方株HPV16L1基因与标准株、中国株之间均存在差异,但与后者的差异极小,未造成氨基酸改变。

    [关键词] 宫颈肿瘤.病毒学;乳头状瘤病毒,人.遗传学;序列分析;江苏

    人乳头瘤病毒(human papillomavious,HPV)属乳头瘤多空病毒科乳头瘤病毒属,人是其惟一宿主,皮肤、黏膜上皮为HPV的易感部位。目前发现HPV至少有100多种型别,约30个型的HPV可通过性接触感染生殖器部位。在我国由HPV感染引起的尖锐湿疣居性传播性疾病的第二位,发病年龄以20~34岁为最多,宫颈尖锐湿疣在性活跃的妇女中高度流行 [1] 。研究还发现,在宫颈癌、宫颈原位癌、阴茎癌、外阴癌、肛周癌、喉乳头瘤等肿瘤组织中均可检出HPV DNA,90%以上的宫颈癌和HPV感染有关 [2] ,其中HPV16型感染率最高,约50%的宫颈癌患者肿瘤组织的DNA为HPV16型 [3] 。因HPV感染性疾病是难治性、复发性、具有潜在致癌性的疾病,逐渐引起人们的重视。研制有效的HPV疫苗,预防HPV感染和进行免疫治疗已成为国内外学者研究的热点。为了了解扬州地区HPV16L1基因结构特点,建立HPV16感染的早期诊断学方法和研制预防性疫苗,我们从5例HPV16阳性的宫颈癌组织DNA中扩增L1基因片段,并进行克隆和序列分析。

     1 材料和方法

    1.1 标本来源

    宫颈癌手术切除组织标本11例 ......

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