[摘要]目的: 探讨维生素C是否能影响三氧化二砷(As 2 O3 )诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡，以及它对细胞内端粒酶活性的影响。 方法: 用噻唑蓝(MTT)法筛选出维生素C的最佳浓度250μmol·L -1 ，并用该浓度联合不同浓度的As2 O3 同时处理HeLa细胞后，用光镜、MTT法和流式细胞术研究细胞生长和凋亡的情况，用TRAP.ELISA法检测细胞内端粒酶活性的变化。 结果: 单独1μmol·L -1 As2 O3 处理过的细胞生长未受到明显抑制，但联合250μmol·L-1 维生素C处理细胞，则细胞生长受到抑制，且部分细胞出现凋亡形态学特征。2、5、10μmol·L-1 As2 O3 联合维生素C用药组的细胞凋亡率也比单独用As 2 O 3 组明显增高，且出现凋亡的时间提早。端粒酶活性检测结果提示，联合用药组细胞内端粒酶活性均明显比单独用As2 O3 组低。 结论: 小剂量维生素C能增强As2 O 3 诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡，并能增强As2 O3 对细胞内端粒酶活性的抑制作用。

    [关键词] 维生素C;三氧化二砷;HeLa细胞;细胞凋亡;端粒酶

    维生素C是自然界广泛存在的一种抗氧化剂，但近来研究表明维生素C不仅有抗氧化作用而且表现出一定的亲氧化作用[1] 。三氧化二砷(As 2 O3 )是中药砒霜的主要成分，具有一定的抗肿瘤作用。最近有研究显示维生素C可增强As 2 O3 诱导白血病细胞凋亡的作用[2～4] ，这种增强作用被认为可能与降低细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平和提高细胞内活性氧类(re-active oxygen species，ROS)水平有关[3，4] ，但具体机制不十分明确。本研究小组前期的工作显示As2 O3 能诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡，这一作用可能与其抑制端粒酶活性有关[5] 。本研究旨在进一步研究维生素C对As2 O3 诱导HeLa细胞凋亡的影响，以及维生素C联合As2 O3 对宫颈癌HeLa细胞内端粒酶活性的影响。

     1 材料和方法

    1.1 试剂As2 O3 (Sigma)用1mmol·L-1 NaOH将其完全溶解，调pH至7.2，用灭菌双蒸水配制成10mmol·L-1 溶液，4℃贮存，使用时用RPMI1640培养液稀释为工作浓度。噻唑蓝(MTT)和HEPES购自Amresco公司，RPMI1640培养基(粉剂)购自Gibco公司，维生素C购自Sig- ma公司，小牛血清购自杭州四季青公司，TRAP.ELISA试剂盒来自Roche公司，RT.PCR试剂盒来自Promega公司 ......