二阶导数分光光度法测定维生素E霜的含量
作者：张洪 马俊玲 周健
单位：湖北医科大学附属第一医院药学部，湖北武汉 430060
关键词：二阶导数分光光度法；维生素E；药物分析
广东药学院学报000210
摘 要 用二阶导数分光光度法测定维生素E霜中维生素E的含量，可消除基质对测定的干扰，方便简便、快速且准确。回收率为98.24%(RSD=0.61%)。
中图号 R927.2 文献标识码:A
文章编号:1006-8783(2000)02-0112-03
维生素E霜主要成分为维生素E(Ⅰ)，现行测Ⅰ含量标准[1]采用气相色谱法，由于基质的干扰，无法按标准方法进行含量测定。我们根据Ⅰ的紫外吸收特点，用二阶导数分光光度法消除基质的干扰，不经提取分离，直接测定Ⅰ的含量，方法简便、快速、准确可靠。适合医院对该制剂质量控制的要求。
, 百拇医药
1 仪器与试剂
UV-265紫外分光光度计(日本岛津)，Ⅰ对照品(中国药品生物制品检定所)，其他试剂均为分析纯，Ⅰ霜剂(本药学部制剂室提供)。
2 方法与结果
2.1 实验方法的选择
精密称取Ⅰ对照品0.2508 g，置100 mL容量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度作为供试液。另称取空白霜剂25.0 g置100 mL容量瓶中，加适量无水乙醇，振摇10 min，无水乙醇定容，摇匀，冰箱放置1 h，滤过，取续滤液作为干扰液。分别精密量取供试液与干扰液各3 mL置50 mL容量瓶中，加无水乙醇，摇匀。以无水乙醇为空白，分别测零阶光谱和二阶导数光谱(图1、图2)，二阶导数光谱表明，可在289 nm处测曲线的峰值进行Ⅰ的定量，干扰物在此处吸收为零。
, 百拇医药
图1 零阶光谱
——维生素E ……基质
图2 二阶导数光谱
——维生素E ……基质
2.2 标准曲线的绘制
精密吸取上述Ⅰ供试液1、2、3、4、5、6 mL分别置50 mL容量瓶中，加无水乙醇定容，摇匀，以无水乙醇为空白，测二阶导数值，以289 nm处峰值吸收度A对浓度C进行回归，得回归方程为A=1.2×10-3C-1.1×10-3(r=0.9994)。见表1。
表1 标准曲线测定 编 号
, 百拇医药
ρ/(μg/mL)
吸收度
1
50.16
0.059
2
100.32
0.116
3
150.48
0.178
4
200.64
, http://www.100md.com
0.239
5
250.80
0.289
6
300.96
0.358
2.3 回收率试验
精密称取Ⅰ对照品约0.25 g,置100 mL容量瓶中，按处方量加入基质(包括其他成分)，加适量无水乙醇，振摇10 min，用无水乙醇定容，摇匀，冰箱放置1 h，滤过，取续滤液3 mL置50 mL容量瓶中，加无水乙醇定容，摇匀，以无水乙醇为空白测二阶导数值，将吸收值代入回归方程计算，每一浓度测量3次取其平均值，回收率结果见表2。表2 回收率测定(n=3) 编号
, 百拇医药
m(加入量)/
g
m(测得量)/
g
回收率/
%
1
0.2496
0.2474
99.1
2
0.2507
0.2469
, 百拇医药
98.5
3
0.2512
0.2452
97.6
4
0.2491
0.2436
97.8
5
0.2503
0.2458
98.2
, http://www.100md.com
平均回收率=98.24%,RSD=0.61%
2.4 精密度试验
精密吸取上述Ⅰ供试液3 mL，共5份，分别置50 mL容量瓶中，加无水乙醇定容，测定，每分测定5次，结果RSD为1.07%。
2.5 稳定性试验
取精密度实验项下其中两份，分别在暗处和亮处放置不同时间，每隔10 min测定1次，结果暗处在1.5 h内吸收度RSD为3.61%，亮处在40 min内吸收度RSD为3.55%。
2.6 样品测定
精密称取样品25.0 g(相当于Ⅰ 0.25 g)，置100 mL容量瓶中，加适量无水乙醇，振摇10 min，以下同回收率项下操作，结果见表3。表3 样品测定(n=5) 批号
, http://www.100md.com
ω/
mg/g
相当于标示量/
%
RSD/
%
990818
10.29
102.9
0.46
990821
9.96
99.6
, 百拇医药
0.45
990916
10.10
101.0
0.72
990924
9.79
97.9
0.77
991008
10.10
101.0
1.01
, 百拇医药
3 讨论
Ⅰ及Ⅰ的制剂含量测定除药典法外，还有紫外分光光度法[2]、一阶导数光谱法[3]、二阶导数光谱法[4]等。由于Ⅰ制剂处方不同，因此采取的定量方法也不同。本文霜剂基质中含有尼泊金乙酯、蜂蜜、珍珠粉及其它成分等，其零阶及一阶导数吸收对Ⅰ的测定均有影响，采用二阶导数光谱测定法能很好的消除基质的干扰。另外，Ⅰ的化学性质不稳定，易氧化，尤其遇光易变色，因此，在整个操作过程中，尽量避光，采用棕色容量瓶，并尽可能快速操作。
参考文献
[1]中国药典(一九九五年版二部)[S].1995.830.
[2]冯琳，张红梅，王景祥.维生素E微囊的制备及其稳定性研究[J].中国医院药学杂志，1997，17(1)：3
[3]李国锋，庄志铨，周日红,等.一阶导数光谱法测定维生素E霜中维生素E含量时的应用[J].第一军医大学学报，1995，15(2)：153.
[4]朱品业.二阶导数光谱法测定脑力宝中维生素E的含量[J].中成药，1991，13(2)：11.
(收稿日期 2000-03-04), 百拇医药
单位：湖北医科大学附属第一医院药学部，湖北武汉 430060
关键词：二阶导数分光光度法；维生素E；药物分析
广东药学院学报000210
摘 要 用二阶导数分光光度法测定维生素E霜中维生素E的含量，可消除基质对测定的干扰，方便简便、快速且准确。回收率为98.24%(RSD=0.61%)。
中图号 R927.2 文献标识码:A
文章编号:1006-8783(2000)02-0112-03
维生素E霜主要成分为维生素E(Ⅰ)，现行测Ⅰ含量标准[1]采用气相色谱法，由于基质的干扰，无法按标准方法进行含量测定。我们根据Ⅰ的紫外吸收特点，用二阶导数分光光度法消除基质的干扰，不经提取分离，直接测定Ⅰ的含量，方法简便、快速、准确可靠。适合医院对该制剂质量控制的要求。
, 百拇医药
1 仪器与试剂
UV-265紫外分光光度计(日本岛津)，Ⅰ对照品(中国药品生物制品检定所)，其他试剂均为分析纯，Ⅰ霜剂(本药学部制剂室提供)。
2 方法与结果
2.1 实验方法的选择
精密称取Ⅰ对照品0.2508 g，置100 mL容量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度作为供试液。另称取空白霜剂25.0 g置100 mL容量瓶中，加适量无水乙醇，振摇10 min，无水乙醇定容，摇匀，冰箱放置1 h，滤过，取续滤液作为干扰液。分别精密量取供试液与干扰液各3 mL置50 mL容量瓶中，加无水乙醇，摇匀。以无水乙醇为空白，分别测零阶光谱和二阶导数光谱(图1、图2)，二阶导数光谱表明，可在289 nm处测曲线的峰值进行Ⅰ的定量，干扰物在此处吸收为零。
, 百拇医药
图1 零阶光谱
——维生素E ……基质
图2 二阶导数光谱
——维生素E ……基质
2.2 标准曲线的绘制
精密吸取上述Ⅰ供试液1、2、3、4、5、6 mL分别置50 mL容量瓶中，加无水乙醇定容，摇匀，以无水乙醇为空白，测二阶导数值，以289 nm处峰值吸收度A对浓度C进行回归，得回归方程为A=1.2×10-3C-1.1×10-3(r=0.9994)。见表1。
表1 标准曲线测定 编 号
, 百拇医药
ρ/(μg/mL)
吸收度
1
50.16
0.059
2
100.32
0.116
3
150.48
0.178
4
200.64
, http://www.100md.com
0.239
5
250.80
0.289
6
300.96
0.358
2.3 回收率试验
精密称取Ⅰ对照品约0.25 g,置100 mL容量瓶中，按处方量加入基质(包括其他成分)，加适量无水乙醇，振摇10 min，用无水乙醇定容，摇匀，冰箱放置1 h，滤过，取续滤液3 mL置50 mL容量瓶中，加无水乙醇定容，摇匀，以无水乙醇为空白测二阶导数值，将吸收值代入回归方程计算，每一浓度测量3次取其平均值，回收率结果见表2。表2 回收率测定(n=3) 编号
, 百拇医药
m(加入量)/
g
m(测得量)/
g
回收率/
%
1
0.2496
0.2474
99.1
2
0.2507
0.2469
, 百拇医药
98.5
3
0.2512
0.2452
97.6
4
0.2491
0.2436
97.8
5
0.2503
0.2458
98.2
, http://www.100md.com
平均回收率=98.24%,RSD=0.61%
2.4 精密度试验
精密吸取上述Ⅰ供试液3 mL，共5份，分别置50 mL容量瓶中，加无水乙醇定容，测定，每分测定5次，结果RSD为1.07%。
2.5 稳定性试验
取精密度实验项下其中两份，分别在暗处和亮处放置不同时间，每隔10 min测定1次，结果暗处在1.5 h内吸收度RSD为3.61%，亮处在40 min内吸收度RSD为3.55%。
2.6 样品测定
精密称取样品25.0 g(相当于Ⅰ 0.25 g)，置100 mL容量瓶中，加适量无水乙醇，振摇10 min，以下同回收率项下操作，结果见表3。表3 样品测定(n=5) 批号
, http://www.100md.com
ω/
mg/g
相当于标示量/
%
RSD/
%
990818
10.29
102.9
0.46
990821
9.96
99.6
, 百拇医药
0.45
990916
10.10
101.0
0.72
990924
9.79
97.9
0.77
991008
10.10
101.0
1.01
, 百拇医药
3 讨论
Ⅰ及Ⅰ的制剂含量测定除药典法外，还有紫外分光光度法[2]、一阶导数光谱法[3]、二阶导数光谱法[4]等。由于Ⅰ制剂处方不同，因此采取的定量方法也不同。本文霜剂基质中含有尼泊金乙酯、蜂蜜、珍珠粉及其它成分等，其零阶及一阶导数吸收对Ⅰ的测定均有影响，采用二阶导数光谱测定法能很好的消除基质的干扰。另外，Ⅰ的化学性质不稳定，易氧化，尤其遇光易变色，因此，在整个操作过程中，尽量避光，采用棕色容量瓶，并尽可能快速操作。
参考文献
[1]中国药典(一九九五年版二部)[S].1995.830.
[2]冯琳，张红梅，王景祥.维生素E微囊的制备及其稳定性研究[J].中国医院药学杂志，1997，17(1)：3
[3]李国锋，庄志铨，周日红,等.一阶导数光谱法测定维生素E霜中维生素E含量时的应用[J].第一军医大学学报，1995，15(2)：153.
[4]朱品业.二阶导数光谱法测定脑力宝中维生素E的含量[J].中成药，1991，13(2)：11.
(收稿日期 2000-03-04), 百拇医药