关键词：人发角蛋白；胶原海绵；真皮替代物；生物活性

    摘要 目的 制备一种人发角蛋白-胶原海绵的三维立体多孔状结构材料，探讨将其作为真皮替代物的可行性。方法 将人发在体内具有慢(Z)、中(B)、快(F)三种吸收速度的HHK组分材料编织成网孔为1 mm×1mm的网格，以酸溶法从牛跟腱中抽提胶原原液，用离心、盐析、透析等方法制备I型胶原蛋白溶液，向溶液中滴加胶原总量8%的6-硫酸软骨素(6-GAG)进行初交联。 制备好的I型胶原溶液与HHK网格混合后放入模具，真空冷冻干燥成海绵状膜，于0.25%的戊二醛溶液中浸泡再交联。将制备好的HHK-胶原海绵膜切块(1 cm×1 cm大小)移植于21只大鼠的真皮与皮下组织之间(实验组)，并与单纯胶原海绵膜组(阴性对照)、单纯全层皮肤切开组(空白对照)作对照。于术后3 d和1、2、4、6、8、12周7个不同时间点取材料及其周围组织，行石蜡切片的HE染色、醛复红弹性纤维染色观察及扫描电镜观察检测其组织相容性、血管化能力及材料的体内降解情况。结果人发角蛋白呈棕黄色细丝状。胶原海绵膜为微黄色，半透明状，孔径为50至300 μm的三维立体状结构。皮下移植后3 d，各组均表现为中度炎症反应，以中性粒细胞和单核细胞为主。术后1周，炎症反应稍减轻，材料周围可见少量成纤维细胞及新生血管，实验组较对照组明显。术后2周，实验组及阴性对照，炎性细胞中巨噬细胞增多，实验组成纤维细胞增生活跃，分泌少量胶原物，材料周围新生血管数量增多。HHK及胶原海绵开始降解。创口表皮细胞增殖移行。电镜下可见实验组材料周围包绕的胶原纤维和弹性纤维，人发角蛋白毛小皮降解、剥离；术后4周，成纤维细胞分泌大量粗大的胶原物。创口的表皮细胞增殖移行明显，实验组基本愈合。两种材料崩解明显，胶原海绵网孔内可见巨噬细胞侵入及少量小血管长入。醛复红弹性纤维染色可见短棒或细长条状弹性纤维；术后6至8周，成纤维细胞数量相对减少，分泌胶原物融合成均质粗大，实验组其排列趋于整齐，表皮层愈合良好。人发角蛋白材料中部出现降解裂隙，胶原海绵基本降解完全。实验组醛复红弹性纤维染色可见细长条状弹性纤维；术后12周，人发角蛋白材料降解完全。结论 人发角蛋白-胶原海绵膜是物理及生物学性能良好的材。其组织相容性好，血管化能力强，能刺激细胞增殖，促进受损皮肤愈合，可作为真皮替代物。

    Preparation and bioactivity of human hair keratin-collagen sponge, a new type of dermal analogue * ......