Fas靶向RNA干扰质粒载体的构建及生物活性鉴定
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刘苏虎;张王刚;张镁;朱青;田玮;孙静昕
Fas蛋白;RNA干扰;质粒;载体构建
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刘苏虎;张王刚;张镁;朱青;田玮;孙静昕
西安交通大学第二医院血液科;西安交通大学第二医院病理科;陕西西安
【关键词】
Fas蛋白;RNA干扰;质粒;载体构建
【发表年期页】
2005,2; 115-118,123
【摘要】
目的 构建Fas靶向的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Fas表达在急性再生障碍性贫血治疗中的意义奠定基础。方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入改造后的pcDNA3.1,获得RNA干扰载体pU6 siFas。脂质体法将pU6 siFas导入P815 细胞,免疫组化法检测对P815 细胞Fas表达的抑制情况。结果 所构建的载体pU6 siFas能够干扰P815细胞中Fas的表达,并且具有新霉素抗性,能够用G 418 筛选稳定转化的细胞株。结论 成功构建了抑制小鼠Fas表达的RNA干扰质粒载体。
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