骨髓间质干细胞的分离培养与鉴定
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蒋文慧; 马爱群; 董安平; 冯敏; 郑小璞; 王亭忠; 耿
骨髓间充质干细胞;分离培养;鉴定;兔
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蒋文慧; 马爱群; 董安平; 冯敏; 郑小璞; 王亭忠; 耿涛; 许正云
西安交通大学第一医院心血管内科; 教育部环境与疾病相关基因重点实验室; 陕西西安
【关键词】
骨髓间充质干细胞; 分离培养; 鉴定; 兔
【发表年期页】
2005,3; 224-227
【摘要】
目的建立兔骨髓间质干细胞(MSCs)的体外分离纯化、扩增和鉴定的方法,为MSCs的进一步诱导分化和应用奠定基础。方法抽取兔胫骨骨髓,密度梯度离心,得到骨髓单个核细胞,接种后形成单层贴壁细胞,经胰蛋白酶消化后传代培养扩增,倒置显微镜下观察原代和传代细胞的生长特性。通过免疫荧光组织化学、流式细胞分析和透射电镜鉴定细胞。结果分离培养的骨髓MSCs贴壁、呈梭形,原代细胞呈集落生长,7~10d达到融合,传代后增殖速度加快;骨髓MSCs表达CD90,反复传代后表达效率增高,不表达CD34;透射电镜可见细胞表面有大量的绒毛突起,胞浆中有丰富的粗面内质网和线粒体,核大,形态不规则。结论密度梯度离心结合贴壁法,以及消化传代能有效分离纯化和扩增骨髓MSCs,分离培养的细胞具有骨髓MSCs的基本表型和特性。
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