溴甲酚绿法测定血清白蛋白时吐温80的浓度
血清蛋白测定方法很多,目前国内临床实验室应用较广者还是溴甲酚绿法。该法在显色剂中需要加入适量的非离子型表面活性剂,其作用在于降低空白读数,防止蛋白沉淀以及增强蛋白与染料的结合,从而提高试验的敏感性。目前国内文献所介绍的表面活性剂当以聚乙烯月桂醚为首选[1],但该试剂市场上经常缺货,购买困难而又不经济,因此我们实验室采用1~2ml/L的吐温80来代替,效果较好。
1 材料和方法
1.1 仪器 GB-ITI型半自动生化分析仪。
1.2 试剂
1.2.1 BCG试剂按文献[1]方法配制。
1.2.2 40g/L白蛋白标准液。
1.2.3 吐温80由上海化学试剂厂提供。
1.3 方法
1.3.1 按文献[1]方法测定630nm、HLB标准液加试剂后混合立即读吸光度A值。
1.3.2 用7种不同浓度吐温80代替聚乙烯月桂醚,ALB标准液加试剂(改良)后立即读吸光度A值。另外用不同浓度的ALB标准液测此方法的线性。
2 结果
见表1。
表1 7种不同浓度吐温80代替聚乙烯月桂醚控制结果(略)
3 讨论
我们在近几年的实际工作中发现如按文献中所规定的吐温80用量(10ml/L)测定血清白蛋白其显色的敏感性将比使用聚乙烯月桂醚相差4倍[2],实验结果不令人满意,为此我们对吐温80作用效果与浓度的关系进行了实验性的探讨,结果当吐温80的浓度在1~2ml/L时,其效果与聚乙烯月桂醚基本一致。而且试剂成本低、准确率高(CV≤2.5%),要求条件不高(10~37℃均可),值得应用。
参考文献
[1] 叶应妩.全国临床检验操作规程[M].第2版.1997:157
[2] 白晓平.吐温80在BCG法测定血清白蛋白中的作用[J].医学检验进修杂志,1994,3:176
作者单位:黑龙江省肇源县防疫站(张世昶)
齐齐哈尔医学院附属第二医院检验科(王岐)
邮编 166500, 百拇医药(张世昶 王岐)
1 材料和方法
1.1 仪器 GB-ITI型半自动生化分析仪。
1.2 试剂
1.2.1 BCG试剂按文献[1]方法配制。
1.2.2 40g/L白蛋白标准液。
1.2.3 吐温80由上海化学试剂厂提供。
1.3 方法
1.3.1 按文献[1]方法测定630nm、HLB标准液加试剂后混合立即读吸光度A值。
1.3.2 用7种不同浓度吐温80代替聚乙烯月桂醚,ALB标准液加试剂(改良)后立即读吸光度A值。另外用不同浓度的ALB标准液测此方法的线性。
2 结果
见表1。
表1 7种不同浓度吐温80代替聚乙烯月桂醚控制结果(略)
3 讨论
我们在近几年的实际工作中发现如按文献中所规定的吐温80用量(10ml/L)测定血清白蛋白其显色的敏感性将比使用聚乙烯月桂醚相差4倍[2],实验结果不令人满意,为此我们对吐温80作用效果与浓度的关系进行了实验性的探讨,结果当吐温80的浓度在1~2ml/L时,其效果与聚乙烯月桂醚基本一致。而且试剂成本低、准确率高(CV≤2.5%),要求条件不高(10~37℃均可),值得应用。
参考文献
[1] 叶应妩.全国临床检验操作规程[M].第2版.1997:157
[2] 白晓平.吐温80在BCG法测定血清白蛋白中的作用[J].医学检验进修杂志,1994,3:176
作者单位:黑龙江省肇源县防疫站(张世昶)
齐齐哈尔医学院附属第二医院检验科(王岐)
邮编 166500, 百拇医药(张世昶 王岐)