HCV复制子复制效率的影响因素及意义
肝炎病毒,,肝炎病毒,丙型；复制子；变异(遗传学)；细胞容受性,0引言,1细胞培养适应性变异,2宿主细胞容受性,【参考文献】
【关键词】 肝炎病毒,丙型；复制子；变异(遗传学)；细胞容受性0引言
自1989年丙型肝炎病毒(hepatitis C virus， HCV)发现以来，HCV 体外细胞模型研究一直是HCV 研究的热点问题之一，能在人肝癌细胞系中高水平自主复制的HCV复制子系统的出现，大大加强了HCV体外复制机制的研究. 至1999年复制子模型系统被首次描述以来，这个系统逐步得到了完善. 特别是细胞培养适应性变异及宿主细胞容受性这两个能明显增强HCV体外复制能力的重要因素的发现，拓展了复制子系统的应用领域，如瞬时复制系统、选择性全长基因组及基础研究和抗病毒药物筛选所需各种新型复制子的构建. 最终，复制子系统将有助于诠释α干扰素抗性的分子基础. 我们就复制子的适应性变异和细胞容受性问题进行综述.
1细胞培养适应性变异
1.1细胞培养适应性变异区域适应性变异现象[1-2]最初是通过在G418筛选的细胞克隆内复制的HCV RNA序列分析而发现的，在多种情况下，发现一个特定细胞内复制的复制子RNA分子群体内，HCV编码区至少可见一个位点变异，致一个氨基酸替代，而该氨基酸的替代在这个细胞克隆中所有RNA分子间是很保守的，尽管每一个HCV非结构蛋白都可见这种“保守性”变异，它们集中于某些特定的区域. 主要集中区域位于NS5A丝氨酸(该蛋白高度磷酸化所需氨基酸)富集的中心区域，研究显示该区域丝氨酸残基常被替代(S2197， S2201， S2204)[3]，而NS5A高度磷酸化在控制HCV RNA复制过程中起着关键的作用[4]，但迄今尚不清楚NS5A磷酸化的改变如何影响RNA复制. 第二个适应性变异集中区域发生于NS3丝氨酸蛋白酶区域的羧基端及NS3螺旋酶的氨基端[3,5]，三维结构显示大多数变异位于溶媒可接近的分子表面，在螺旋酶区域内，变异似乎限于一个特定的表面，研究显示HCV NS3螺旋酶的RNA解链活性是RNA复制所必须的[6]，而该区域的变异对复制功能的影响需进一步研究. 第三个适应性变异集中区域见于NS4B的两个非常独特的位点[3,7]，基于NS4B的拓扑模型，在K1846T位氨基酸发生替代的情况下，这两个位点位于与透膜区2和3连接的胞质环上，在1897位氨基酸发生替代的情况下，则位于透膜区4的胞质羧基端，在MT2C传代HCV基因组复制子中[7]，还发现1897位苯丙氨酸替代缬氨酸，这个基因组是HCV感染MT2细胞克隆的共有序列并经历了多次传代，表明同样的细胞培养适应性变异发生于不同的HCV分离株. 最近 ......
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