不同方法检测的RF结果对类风湿性关节炎的诊断价值
[摘要] 目的：探讨免疫比浊法和乳胶凝集法检测类风湿因子(RF)结果对类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis ,RA)的临床诊断应用价值。 方法：用免疫比浊法和乳胶凝集法同时检测阳性组21例类风湿性关节炎患者与正常对照组40例健康体检者的RF，并对结果进行比较分析。结果：免疫比浊法检测阳性组结果阳性率为90.5%，正常对照组阳性率为5%；乳胶凝集法检测阳性组结果阳性率为71.4%，正常对照组未检出阳性标本。两种检测方法结果有显著的相关性，r=0.987，P<0.01。结论：两种检测方法结果相关性良好，免疫比浊法检测RF结果诊断价值较高，敏感性优于乳胶凝集法，免疫比浊法将50 IU/ml作为类风湿性关节炎诊断的界限值特异性较高。
[关键词] 类风湿因子；免疫比浊法；乳胶凝集法
Diagnostic Value of Arthritis Deformans with the Results of Rheumatoid Factor(RF) Detected in Different Method
YE Miaoqin， LIAO Benbing
(Huizhou Hospital of T.C.M， Huizhou, Guangdong 516001,China)
Abstract: Objective Approach that use immunoturbidimetry and latex agglutination to detect RF，the result of which have clinical diagnosis value to RA. Method Use immunoturbidimetry and latex agglutination to detect masculine group: 21 examples of RA and normal control group: 40 examples of healthy people's RF, to compare and analyze the results. Results The masculine rate of masculine group with immunoturbidimetry is 90.5%, and the masculine rate of normal control group is 5%. the masculine rate of masculine group with latex agglutination is 71.4%. and there is no masculine exampl in normal control group. There is prominen dependability between two detect method. r=0.987,P<0.01. Conclusion There is a fine dependability between two detect method. detect RF with immunoturbidimetry has a higher diagnostic value, and the sensitivity is surpass to latex agglutination. Immunoturbidimetry treated 50 IU/ml as the threshold value of RA has a higher specificity.
Key words: Rheumatoid factor (RF) immunoturbidimetric assay latex agglutination test
类风湿因子(Rheumatoid factor，RF)是临床诊断类风湿性关节炎(RA)的重要指标之一，其检测方法有很多种：乳胶凝集法、ELISA法、斑点免疫结合法、免疫比浊法等。ELISA法及斑点免疫结合法可根据需要检测各型别的RF，但它们稳定的商品试剂没有广泛供应，应用不广。乳胶凝集法操作简单、快速，不需要特殊仪器，应用很广，特别适合基层医院，但只能做定性或半定量检测，满足不了临床准确定量的要求。近年来随着检验技术的不断发展，各种定量方法逐渐发展起来，免疫比浊法就是其中的一种。我们用免疫比浊法和乳胶凝集法两种方法检测同一批标本的RF结果，并将结果进行比较，探讨其结果对RA临床诊断的价值。
1 材料与方法
1.1 实验对象 阳性组收集我院2005年门诊或住院的21例RA病例，全部符合1988年4月全国中西医结合风湿类疾病学术会议修订通过的RA的诊断标准[1]，其中男5例，女16例，年龄38岁～75岁。正常对照组为来我院体检的健康体检者，年龄25岁～65岁，其中男14例，女26例，均排除肝肾功能异常和内分泌疾病。
1.2 仪器、试剂 日立BM717全自动生化分析仪，西班牙的RF免疫比浊法试剂，以及配套的校准品和质控品；乳胶凝集法试剂由上海捷门生物技术合作公司提供以及配套的阴、阳对照质控品。
1.3 方法 免疫比浊法用日立BM717全自动生化分析仪，西班牙试剂做定量检测，参数严格按照试剂说明书设置，结果大于20 IU/ml为阳性；乳胶凝集法用上海捷门生物技术合作公司的试剂，严格按照说明书操作,原倍血清1 min~3 min内出现均匀凝集颗粒者为阳性(>20 IU/ml)，阳性者血清作一系列的倍比稀释，以出现凝集的最高稀释度对应的值为RF半定量结果。
2 结果
2.1 两种方法检测结果的阳性率比较 免疫比浊法：阳性组结果阳性19例，阴性2例，阳性率为90.5%；正常对照组结果阳性2例，结果为35.6 IU/ml和41.5 IU/ml，阴性38例，阳性率为5%。乳胶凝集法：阳性组结果阳性15例，阴性6例，阳性率为71.4%；正常对照组结果40例均为阴性。两种方法检测结果阳性率比较见表1。
表1 免疫比浊法与乳胶凝集法检测结果阳性率比较(略)
注：※正常对照组免疫比浊法2例阳性的结果均小于50 IU/ml
2.2 两种方法检测结果的相关性分析 乳胶凝集法检出的15例阳性患者RF半定量结果与免疫比浊法定量结果呈平行关系，二者的相关系数r=0.987，P<0.01，有显著的相关性，结果见表2。
表2 免疫比浊法与乳胶凝集法检测阳性结果的相关性分析(略)
3 讨论
RF是一种IgG Fc片段CH2、CH3稳定区决定簇的抗体，RA患者的关节滑膜可产生大量的RF，主要以IgG为主。有文献报道[2]RA国内患者的RF阳性率为70%～80%，国外为50～90%。RF是临床诊断RA的重要指标之一，促使人们不断寻求提高RF测定的灵敏度和特异性的实验方法。本实验比较免疫比浊法和乳胶凝集法检测的RF结果， 阳性组21例RA患者免疫比浊法检测出19例阳性，阳性率为90.5%，乳胶凝集法只检测出15例阳性，阳性率为71.4%，免疫比浊法的阳性率明显高于乳胶凝集法，乳胶凝集法存在19.1%的假阴性结果。正常对照组免疫比浊法检出2例阳性，乳胶凝集法未检出阳性，免疫比浊法检出的2例阳性结果均小于50 IU/ml，并且实验对象没有任何关节炎症状，这可能与免疫比浊法的正常参考范围≤20 IU/ml偏低有关。有文献报道[3]传统上以20 IU/ml作为正常参考值，但作为RA诊断界限并不妥当，在50 IU/ml时灵敏度、特异度均较高，建议将50 IU/ml作为RA诊断的界限值。乳胶凝集法阳性的标本免疫比浊法均为阳性，同时对两种方法检测结果的相关性作了分析，免疫比浊法与乳胶凝集法检测RF的结果呈平行性关系，相关系数r=0.987，P<0.01，有显著的相关性。
RF是RA病程中一个早期的血清学标志并作为RA诊断标准之一，免疫比浊法和乳胶凝集法检测RA患者的RF均有一部分患者未检出阳性，这可能与RF的类型和隐性RF有关[4]。免疫比浊法检测RF结果作为类风湿性关节炎诊断价值较高，敏感性优于乳胶凝集法，试剂比较稳定，自动化操作的特点减少了人为误差，是目前检测RF较好的方法，但应注意建立合适的参考界限值，以提高方法的特异性。
参考文献：
[1] 王兆铭.中国中西医结合实用风湿病学[M].第1版.北京：中医古籍出版社，1997；319322.
[2] 章菲菲，徐麦玲，邹和建，等.类风湿因子三种检测方法对类风湿性关节炎诊断价值的研究[J].上海：上海医学，2003，7：460463.
[3] 陈宇明，沈新玉，章菲菲，等.类风湿因子检测中乳胶凝集试验与比浊法对比研究[J]. 江西医学检验，2002：5.
[4] 蒋明，朱立平，林孝义.风湿病学[M].北京：科学出版社，1995：376.
(惠州市中医医院，广东 惠州 516001), 百拇医药(叶妙琴，廖奔兵)
[关键词] 类风湿因子；免疫比浊法；乳胶凝集法
Diagnostic Value of Arthritis Deformans with the Results of Rheumatoid Factor(RF) Detected in Different Method
YE Miaoqin， LIAO Benbing
(Huizhou Hospital of T.C.M， Huizhou, Guangdong 516001,China)
Abstract: Objective Approach that use immunoturbidimetry and latex agglutination to detect RF，the result of which have clinical diagnosis value to RA. Method Use immunoturbidimetry and latex agglutination to detect masculine group: 21 examples of RA and normal control group: 40 examples of healthy people's RF, to compare and analyze the results. Results The masculine rate of masculine group with immunoturbidimetry is 90.5%, and the masculine rate of normal control group is 5%. the masculine rate of masculine group with latex agglutination is 71.4%. and there is no masculine exampl in normal control group. There is prominen dependability between two detect method. r=0.987,P<0.01. Conclusion There is a fine dependability between two detect method. detect RF with immunoturbidimetry has a higher diagnostic value, and the sensitivity is surpass to latex agglutination. Immunoturbidimetry treated 50 IU/ml as the threshold value of RA has a higher specificity.
Key words: Rheumatoid factor (RF) immunoturbidimetric assay latex agglutination test
类风湿因子(Rheumatoid factor，RF)是临床诊断类风湿性关节炎(RA)的重要指标之一，其检测方法有很多种：乳胶凝集法、ELISA法、斑点免疫结合法、免疫比浊法等。ELISA法及斑点免疫结合法可根据需要检测各型别的RF，但它们稳定的商品试剂没有广泛供应，应用不广。乳胶凝集法操作简单、快速，不需要特殊仪器，应用很广，特别适合基层医院，但只能做定性或半定量检测，满足不了临床准确定量的要求。近年来随着检验技术的不断发展，各种定量方法逐渐发展起来，免疫比浊法就是其中的一种。我们用免疫比浊法和乳胶凝集法两种方法检测同一批标本的RF结果，并将结果进行比较，探讨其结果对RA临床诊断的价值。
1 材料与方法
1.1 实验对象 阳性组收集我院2005年门诊或住院的21例RA病例，全部符合1988年4月全国中西医结合风湿类疾病学术会议修订通过的RA的诊断标准[1]，其中男5例，女16例，年龄38岁～75岁。正常对照组为来我院体检的健康体检者，年龄25岁～65岁，其中男14例，女26例，均排除肝肾功能异常和内分泌疾病。
1.2 仪器、试剂 日立BM717全自动生化分析仪，西班牙的RF免疫比浊法试剂，以及配套的校准品和质控品；乳胶凝集法试剂由上海捷门生物技术合作公司提供以及配套的阴、阳对照质控品。
1.3 方法 免疫比浊法用日立BM717全自动生化分析仪，西班牙试剂做定量检测，参数严格按照试剂说明书设置，结果大于20 IU/ml为阳性；乳胶凝集法用上海捷门生物技术合作公司的试剂，严格按照说明书操作,原倍血清1 min~3 min内出现均匀凝集颗粒者为阳性(>20 IU/ml)，阳性者血清作一系列的倍比稀释，以出现凝集的最高稀释度对应的值为RF半定量结果。
2 结果
2.1 两种方法检测结果的阳性率比较 免疫比浊法：阳性组结果阳性19例，阴性2例，阳性率为90.5%；正常对照组结果阳性2例，结果为35.6 IU/ml和41.5 IU/ml，阴性38例，阳性率为5%。乳胶凝集法：阳性组结果阳性15例，阴性6例，阳性率为71.4%；正常对照组结果40例均为阴性。两种方法检测结果阳性率比较见表1。
表1 免疫比浊法与乳胶凝集法检测结果阳性率比较(略)
注：※正常对照组免疫比浊法2例阳性的结果均小于50 IU/ml
2.2 两种方法检测结果的相关性分析 乳胶凝集法检出的15例阳性患者RF半定量结果与免疫比浊法定量结果呈平行关系，二者的相关系数r=0.987，P<0.01，有显著的相关性，结果见表2。
表2 免疫比浊法与乳胶凝集法检测阳性结果的相关性分析(略)
3 讨论
RF是一种IgG Fc片段CH2、CH3稳定区决定簇的抗体，RA患者的关节滑膜可产生大量的RF，主要以IgG为主。有文献报道[2]RA国内患者的RF阳性率为70%～80%，国外为50～90%。RF是临床诊断RA的重要指标之一，促使人们不断寻求提高RF测定的灵敏度和特异性的实验方法。本实验比较免疫比浊法和乳胶凝集法检测的RF结果， 阳性组21例RA患者免疫比浊法检测出19例阳性，阳性率为90.5%，乳胶凝集法只检测出15例阳性，阳性率为71.4%，免疫比浊法的阳性率明显高于乳胶凝集法，乳胶凝集法存在19.1%的假阴性结果。正常对照组免疫比浊法检出2例阳性，乳胶凝集法未检出阳性，免疫比浊法检出的2例阳性结果均小于50 IU/ml，并且实验对象没有任何关节炎症状，这可能与免疫比浊法的正常参考范围≤20 IU/ml偏低有关。有文献报道[3]传统上以20 IU/ml作为正常参考值，但作为RA诊断界限并不妥当，在50 IU/ml时灵敏度、特异度均较高，建议将50 IU/ml作为RA诊断的界限值。乳胶凝集法阳性的标本免疫比浊法均为阳性，同时对两种方法检测结果的相关性作了分析，免疫比浊法与乳胶凝集法检测RF的结果呈平行性关系，相关系数r=0.987，P<0.01，有显著的相关性。
RF是RA病程中一个早期的血清学标志并作为RA诊断标准之一，免疫比浊法和乳胶凝集法检测RA患者的RF均有一部分患者未检出阳性，这可能与RF的类型和隐性RF有关[4]。免疫比浊法检测RF结果作为类风湿性关节炎诊断价值较高，敏感性优于乳胶凝集法，试剂比较稳定，自动化操作的特点减少了人为误差，是目前检测RF较好的方法，但应注意建立合适的参考界限值，以提高方法的特异性。
参考文献：
[1] 王兆铭.中国中西医结合实用风湿病学[M].第1版.北京：中医古籍出版社，1997；319322.
[2] 章菲菲，徐麦玲，邹和建，等.类风湿因子三种检测方法对类风湿性关节炎诊断价值的研究[J].上海：上海医学，2003，7：460463.
[3] 陈宇明，沈新玉，章菲菲，等.类风湿因子检测中乳胶凝集试验与比浊法对比研究[J]. 江西医学检验，2002：5.
[4] 蒋明，朱立平，林孝义.风湿病学[M].北京：科学出版社，1995：376.
(惠州市中医医院，广东 惠州 516001), 百拇医药(叶妙琴，廖奔兵)