摘要 RNA干扰(RNA interference，RNAi)是由21个～23个核苷酸组成的双链RNA(dsRNA)所引发的生物细胞内同源基因转录后沉默的现象，是生物体在进化过程中普遍存在的一种基因调控机制。利用RNAi技术的高效性和特异性抵御病毒感染及其它外源性核酸入侵的研究，已取得了很大进展，针对乙肝病毒感染这一全球性的健康问题，RNAi有着广泛的应用前景。

    关键词 RNA干扰技术;dsRNA;基因沉默;乙肝病毒感染

    据统计，全世界大约有3.5亿乙型肝炎病毒慢性感染者。乙型肝炎病毒的长期存在，可以导致肝细胞持续损害和肝纤维化，甚至发展为肝硬化、肝癌 [1] 。过去的二十年中，虽然疫苗计划免疫降低了急性、慢性乙肝病毒感染的发生率。一些抗病毒药物如干扰素-α及核苷酸类似物的合理应用也使很大一部分患者的病情得以控制。但是，抗HBV治疗，阻断肝细胞内肝炎病毒基因的复制和表达，仍是目前难题之一。2002年度被美国SCIENCE杂志评选为最重要科技突破之一的RNA干扰技术，即由双链RNA介导的，引发生物细胞内同源基因特异性转录后沉默(post-transcriptional gene si-lence，PTGS)的过程，为抗乙肝病毒基因治疗提供了新的策略。

     1 RNA干扰现象的发现

    早在10多年以前，Rich Jorgensen和他的同事对矮牵牛花进行研究时发现，将一个能产生紫色色素的基因置于启动子之后导入矮牵牛花中，想通过色素基因的不断复制来加深花朵紫色，结果不但没有看到紫色加深的花朵，反而发现多数花变成了白色或部分白色。Jorgensen将这种导入基因和与其相似的内源基因同时都被抑制的现象命名为协同抑制(cosuppression)(Jorgensen RA，et al.1990)。1995年康乃尔大学的Guo及Kamphues研究美丽线虫中par-1基因功能时发现，无论par-1基因的正义RNA还是反义RNA都能够阻断par-1基因的表达(Guo S，et al，1995)。1998年华盛顿卡耐基研究院的Andrew Fire和马萨诸塞大学癌症中心的Craing Mello将体外转录合成的正义RNA及反义RNA退火形成dsRNA后导入美丽线虫，结果看到比单独注射正义链或反义链更有效的基因沉默。而且每个细胞只需几个分子的dsRNA就能够完全阻断同源基因的表达，这种抑制效应还可以传递给子代 [2] 。因此，这种现象被称作RNA干扰(RNA interference，RNAi)。1999年Zamore与他的同事在研究果蝇细胞的RNAi现象时发现 ......