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编号:11023337
RAPD扩增分枝杆菌DNA优化条件及菌型分型的诊断应用
http://www.100md.com 《中国热带医学杂志》 2006年第5期
分枝杆菌,,分枝杆菌;非典型性;结核杆菌;RAPD;分型,摘要,关键词,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献
     摘要:目的 探讨随机扩增多态性DNA(Randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)技术在分枝杆菌分型诊断中优化条件及其应用价值。 方法 优化RAPD技术扩增分枝杆菌DNA的条件,并分别扩增深圳市临床病人分离株DNA,对比RAPD电泳条带特征。 结果 以条带稳定、丰富、清晰为标准,确定引物1RAPD最佳反应条件为:50μl反应体系中,含100ng模板DNA,2.5mmol/L MgCl 2 ,2U DNA聚合酶,引物0.5μmol/L,dATP、dGTP、dCTP和dTTP各250μmol/L,反应40个循环,每个循环为:94℃1min,36℃1min,72℃2min。所扩增结核杆菌临床分离株的DNA条带丰富、清晰,各条带差异较明显。 结论 RAPD技术能较好地鉴别MTB和NTM。

     关键词:分枝杆菌;非典型性;结核杆菌;RAPD;分型

    The optimized condition for differentiation of Mycobactreium strains by using RAPD and its appliation in strain typing and diagnosis.

    X Li,YANG Ying-zhou,TAN Wei-guo,et al.

    (Shenzhen Municipal Chronic Disease Hospital,Shenzhen518020,Guangdong,P.R.China)

    Abstract:Objective To explore the optimized condition for type differentiation of Mycobacteria strains and its value in applifi-cation by means of randomly amplified polymorphic DNA(RAPD)analysis. Methods RAPD condition for amplifying Mycobacteria DNA of clinically separated Mycobacteril strains from patients in Shenzhen was optimized ......

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