高效液相色谱紫外光度法检测尿液和牛奶中多种头孢类抗生素
头孢羟氨苄,,头孢羟氨苄,头孢克洛,头孢氨苄,头孢拉定,头孢噻吩,头孢类抗生素,高效液相色谱,紫外检测,摘要,关键词,1引言,2实验部分
摘要 使用新型的亲水性较强的C16硅胶反相色谱柱,以水/磷酸缓冲液/乙腈为流动相,流速1mL/min ,在17min内分离了头孢羟氨苄、头孢克洛、头孢氨苄、头孢拉定和头孢噻吩5种头孢类抗生素。分离后的化合物在紫外检测器上检测,检测波长270 nm,线性范围0.1~40 mg/L(r≥0.9993), 5种化合物的检出限依次为97、6.9、5.6、6.4和4.9 μg/L。该方法成功的应用于人尿液和牛奶中头孢类抗生素的检测,2 mg/L浓度水平的加标回收率在96.5%~105%之间。关键词 头孢羟氨苄,头孢克洛,头孢氨苄,头孢拉定,头孢噻吩,头孢类抗生素,高效液相色谱,紫外检测
1 引言
头孢类抗生素自20世纪60年代初发明并应用于临床以来,由于其具有抗菌谱广、抗菌作用强、对青霉素酶稳定、临床疗效高、不良反应较少等特点,是目前临床应用较广泛的抗生素(结构式见表1)。但也引起细菌的耐药性、毒副作用以及过量滥用等问题。因此,建立快速简便的定量检测方法十分重要。
目前,头孢类抗生素采用高效液相色谱方法分析时,所用的检测方法有旋光[1]、荧光 [2]、原子吸收[3,4]、电化学[5,6]及紫外可见分光光度[7,8]等。在这些方法中,紫外可见分光光度法因为其简便、稳定,无需衍生,灵敏度高而得到广泛的应用。但是,紫外可见分光光度结合高效液相分离同时检测多种头孢类化合物的报道并不多见。本研究采用新型的反相色谱柱,优化的流动相和梯度淋洗程序,对头孢羟氨苄、头孢克洛、头孢氨苄、头孢拉定和头孢噻吩5种头孢类抗生素进行了高效的分离,分离后的分析物采用紫外检测器检测。该方法具有简单、灵敏度高的特点。
表1 几种头孢类抗生素的结构(略)
Table 1 The structures of several cephalosporins
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
Dionex 高效液相色谱系统 ......
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