前列通水丸的研制
摘要：目的前列通片改换剂型，为前列通水丸。方法探讨了药材的提取、水丸的制备工艺，并建立质量标准。结果前列通干浸膏的最佳制备工艺水为提取溶剂。挥发油提取时，将药材适当粉碎粗粉(<20目)后，加热回流6 h；挥发油收量较多制备水丸时，用75%乙醇为润湿剂，大约加入处方量的25%~28%，所制丸较好。用HPLC测定该品中盐酸小檗碱的含量，方法简便、快速，结果准确而可靠。结论制备工艺合理，质量可控。
关键词：前列通水丸； 制备工艺； 挥发油； 盐酸小檗； 高效液相色谱
前列通水丸是由前列通片改变剂型而成，前列通片是临床上很受欢迎的治疗前通腺疾病药物。属于片剂，但因片剂加压成型，崩解较慢，生物利用度较低，且部分患者吞服较为困难，因而片剂的推广使用在一定程度上受到限制。故把片剂改为水丸，即体现丸剂的优点，适合于慢性疾病，又符合中医传统的剂型。水丸特点是以水或水性液体为赋形剂，服用后在体内崩解、溶散得快，吸收、起效快，水丸粒小，表面致密光滑，即便于吞服又不易吸潮，利于保管贮存。且不含其他赋形剂，实际含药量高。
将原片剂改制成水丸的工艺，探讨了药材的提取、水丸的制备工艺，并建立了质量标准。
1 前列通水丸处方
前列通干浸膏300 g，八角茴香油1.70 ml，肉桂油0.88 ml，琥珀75 g，前列通干浸膏的处方(薛荔5份，黄芪5.8 份，车前子3.3份，黄柏4.2份，两头尖4.2份，泽兰4.2份，蒲公英4.2份)具有清热解毒、清利湿浊、理气活血、消炎止痛、祛瘀止痛、祛瘀通淋的功效。用于治疗急慢性前列腺炎、前列腺增生等。
2 水提工艺的研究
2.1 浸泡时间及吸水率的考察按处方比例称取药材154.5 g，加入6倍量水(约927 ml)浸泡，每隔1 h测量溶剂体积，至体积不变化为止，结果药材浸泡2 h后，水分吸收完全，吸水率为77.99%。
2.2 正交设计优化水提的工艺因素与水平设计：为全面考察水提工艺条件，将加水量(A)，提取时间(B)，提取次数(C)作为影响因素，每个因素选三个水平，采用正交表L9(34)安排实验，正交实验测定结果：加水量、提取时间和提取次数对盐酸小檗碱含量有显著性影响，其中提取次数对提取有最显著的影响，其次为加水量和提取时间。故最佳提取工艺为A1B2C2，即回流提取2次，均为2 h/次，第1次加水为药材用量的10倍。
2.3 挥发油提取工艺探讨挥发油的提取方法常用的有两种：索氏提取法(熔剂法)和水蒸气蒸馏水。因索氏提取法比较繁琐，不适合于工业生产，所以我们决定采用水蒸气蒸馏法，并考察了其提取工艺条件。
出油量6 h以后显著性差异，加8倍量水，挥发油的提取时间确定为6 h挥发油含量最高。
2.4 制剂成型工艺本品为水丸剂不需要复杂的成型工艺，在完成提取、浓缩、粉碎的工作基础上，再喷入八角茴香和肉桂油，混匀，加入75%乙醇，大约加入处方量的25%~28%。制丸块，制丸条，搓圆，干燥，即得。
3 质量标准的制定
3.1 性状本品为水丸剂，呈棕色至黑色，微带香气。
3.2 鉴别
3.2.1 黄柏的薄层鉴别照薄层色谱法[1]实验，吸取上述两种溶液各2~4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水(4.2∶0.6∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，斑点清晰，重现性良好，而阴性无不扰。
3.2.2 八角茴香油的薄层鉴别照薄层色谱法[1]实验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层上，以苯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧点斑点，斑点清晰，重现性良好，而阴性无干扰。
3.2.3 黄芪的薄层鉴别照薄层色谱法[1]实验，吸取上述两种溶液各4 μl、对照品溶液2 μl，分别点于同一硅胶G薄层上，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)(10℃以下放置过夜)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100℃烘至斑点显色清晰。结果供试品色谱中，在与对照品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，斑点清晰，重现良好，而阴性无干扰。
3.3 含量测定本品是以黄柏、车前子等10味中药组成的复方制剂，黄柏苦寒沉降，长于清泻下焦湿热，是方中主要药材，盐酸小檗碱是其主有效成分。含有黄柏制剂中的盐酸小檗碱含量测定选用了HPLC法，并对测定条件进行了探讨。
3.3.1 色谱条件与系统适用性实验色谱柱为YMC ODS C18(250 mm×460 mm,5 μm)；柱温为25℃；流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢铵(内含0.03%三乙胺，用磷酸调节pH值至2.5)(35∶65)；流速，1.0 ml/min；检测波长345 nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于2 000。
3.3.2 对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品3.3 mg，置50 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1毫升含盐酸小檗碱66μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取20粒本品，撕成小细片，取适量(约相当于4粒)，精密称定，置50 ml量瓶中，加甲醇水(1∶1)30 ml，超声处理30 min，放置室温后，用甲醇水(1∶1)稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。
阴性对照溶液的制备：按处方比例取除黄柏外各药材混匀，精密称取相当于本品4粒重的量，按供试品溶液的制备方法处理，即得。
分别精密取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液适量，进HPLC，按色谱条件扫描，结果可见，在此色谱条件下阴性对照溶液在与对照品峰相应的保留时间处无色谱峰，表明无干扰。
3.4 标准曲线的制备精密称取盐酸小檗碱对照品溶液2 ml，加4 ml甲醇，混匀，滤过。精密吸取2，4，6，8，10 μl，注入认相色谱仪，测定，以进样量为纵坐标线性回归，得方程Y=5 206.4X+6.174 5，R2=0.999 5。
3.5 精密度实验精密吸取对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，重复进样5次，用测定值的相对标准偏差反映仪器的精密度，结果盐酸小檗碱含量均值为355.765 1，RSD=1.13%，表明仪具有良好的精密度。
3.6 重现性实验按供试品溶液制备方法制备同一批号供试品(批号：1)5份，依次进样测定，用测定值的相对偏差反映测定结果的重现性。结果表明，本法具有良好的重现性。
3.7 稳定性实验制备供试品溶液(批号：2)1份，在0，1，2，4，6，8，12，24 h进样，测定，结果表明：在24 h内供试品溶液中盐酸小檗碱含量基本稳定。
3.8 回收率实验精密称取已知含量的供试品(批呈：1，盐酸小檗碱平均含量97.235 6 μg/丸)1.0 g，共取5份，精密加入对照品溶液(盐酸小檗碱浓度：22 μg/ml)1 ml，依法规定。结果表明，盐酸小檗碱平均回收率99.882%(RSD=1.20%)，证明本法测定结果准确、可靠。
4 结论
4.1 浸膏提取工艺，水为提取溶剂，回流提取2次，均为2 h/次。第1次加水为药材用量的10倍，第2次为药材用量的8倍。
4.2 挥发油提取时，将药材适当粉碎成粗粉(<20目)后，加热回流6 h，挥发油收量较多。
4.3 制备水丸时，用75%乙醇为润湿剂，大约加入处方量的25%~28%，所制丸块较好。
4.4 用HPLC测定本品中盐酸小檗碱的含量，快速、结果准确而可靠。色谱条件：乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢胺(内含0.33%三乙胺，用磷酸调节pH值至2.5)(35∶65)流动相，流速1.0 ml/min，检测波长345 nm。本品盐酸小檗碱的含量为97.915 9 μg/丸(>0.045%)，平均回收率为99.882%(RSD=1.20%)。
参考文献：
[1]国家药典委员会,中国药典，Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2000：附录ⅥB.
(吉林省延边大学医学院 133000)
作者简介：金明玉(1965)，女(朝鲜族)，吉林延吉人，现任吉林省延边大学医学院副教授，硕士学位，主要从事中医方剂学与中医妇科学教学工作., 百拇医药(金明玉， 尹寿玉)
关键词：前列通水丸； 制备工艺； 挥发油； 盐酸小檗； 高效液相色谱
前列通水丸是由前列通片改变剂型而成，前列通片是临床上很受欢迎的治疗前通腺疾病药物。属于片剂，但因片剂加压成型，崩解较慢，生物利用度较低，且部分患者吞服较为困难，因而片剂的推广使用在一定程度上受到限制。故把片剂改为水丸，即体现丸剂的优点，适合于慢性疾病，又符合中医传统的剂型。水丸特点是以水或水性液体为赋形剂，服用后在体内崩解、溶散得快，吸收、起效快，水丸粒小，表面致密光滑，即便于吞服又不易吸潮，利于保管贮存。且不含其他赋形剂，实际含药量高。
将原片剂改制成水丸的工艺，探讨了药材的提取、水丸的制备工艺，并建立了质量标准。
1 前列通水丸处方
前列通干浸膏300 g，八角茴香油1.70 ml，肉桂油0.88 ml，琥珀75 g，前列通干浸膏的处方(薛荔5份，黄芪5.8 份，车前子3.3份，黄柏4.2份，两头尖4.2份，泽兰4.2份，蒲公英4.2份)具有清热解毒、清利湿浊、理气活血、消炎止痛、祛瘀止痛、祛瘀通淋的功效。用于治疗急慢性前列腺炎、前列腺增生等。
2 水提工艺的研究
2.1 浸泡时间及吸水率的考察按处方比例称取药材154.5 g，加入6倍量水(约927 ml)浸泡，每隔1 h测量溶剂体积，至体积不变化为止，结果药材浸泡2 h后，水分吸收完全，吸水率为77.99%。
2.2 正交设计优化水提的工艺因素与水平设计：为全面考察水提工艺条件，将加水量(A)，提取时间(B)，提取次数(C)作为影响因素，每个因素选三个水平，采用正交表L9(34)安排实验，正交实验测定结果：加水量、提取时间和提取次数对盐酸小檗碱含量有显著性影响，其中提取次数对提取有最显著的影响，其次为加水量和提取时间。故最佳提取工艺为A1B2C2，即回流提取2次，均为2 h/次，第1次加水为药材用量的10倍。
2.3 挥发油提取工艺探讨挥发油的提取方法常用的有两种：索氏提取法(熔剂法)和水蒸气蒸馏水。因索氏提取法比较繁琐，不适合于工业生产，所以我们决定采用水蒸气蒸馏法，并考察了其提取工艺条件。
出油量6 h以后显著性差异，加8倍量水，挥发油的提取时间确定为6 h挥发油含量最高。
2.4 制剂成型工艺本品为水丸剂不需要复杂的成型工艺，在完成提取、浓缩、粉碎的工作基础上，再喷入八角茴香和肉桂油，混匀，加入75%乙醇，大约加入处方量的25%~28%。制丸块，制丸条，搓圆，干燥，即得。
3 质量标准的制定
3.1 性状本品为水丸剂，呈棕色至黑色，微带香气。
3.2 鉴别
3.2.1 黄柏的薄层鉴别照薄层色谱法[1]实验，吸取上述两种溶液各2~4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水(4.2∶0.6∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，斑点清晰，重现性良好，而阴性无不扰。
3.2.2 八角茴香油的薄层鉴别照薄层色谱法[1]实验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层上，以苯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点清晰。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧点斑点，斑点清晰，重现性良好，而阴性无干扰。
3.2.3 黄芪的薄层鉴别照薄层色谱法[1]实验，吸取上述两种溶液各4 μl、对照品溶液2 μl，分别点于同一硅胶G薄层上，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)(10℃以下放置过夜)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100℃烘至斑点显色清晰。结果供试品色谱中，在与对照品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，斑点清晰，重现良好，而阴性无干扰。
3.3 含量测定本品是以黄柏、车前子等10味中药组成的复方制剂，黄柏苦寒沉降，长于清泻下焦湿热，是方中主要药材，盐酸小檗碱是其主有效成分。含有黄柏制剂中的盐酸小檗碱含量测定选用了HPLC法，并对测定条件进行了探讨。
3.3.1 色谱条件与系统适用性实验色谱柱为YMC ODS C18(250 mm×460 mm,5 μm)；柱温为25℃；流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢铵(内含0.03%三乙胺，用磷酸调节pH值至2.5)(35∶65)；流速，1.0 ml/min；检测波长345 nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于2 000。
3.3.2 对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品3.3 mg，置50 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1毫升含盐酸小檗碱66μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取20粒本品，撕成小细片，取适量(约相当于4粒)，精密称定，置50 ml量瓶中，加甲醇水(1∶1)30 ml，超声处理30 min，放置室温后，用甲醇水(1∶1)稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。
阴性对照溶液的制备：按处方比例取除黄柏外各药材混匀，精密称取相当于本品4粒重的量，按供试品溶液的制备方法处理，即得。
分别精密取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液适量，进HPLC，按色谱条件扫描，结果可见，在此色谱条件下阴性对照溶液在与对照品峰相应的保留时间处无色谱峰，表明无干扰。
3.4 标准曲线的制备精密称取盐酸小檗碱对照品溶液2 ml，加4 ml甲醇，混匀，滤过。精密吸取2，4，6，8，10 μl，注入认相色谱仪，测定，以进样量为纵坐标线性回归，得方程Y=5 206.4X+6.174 5，R2=0.999 5。
3.5 精密度实验精密吸取对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，重复进样5次，用测定值的相对标准偏差反映仪器的精密度，结果盐酸小檗碱含量均值为355.765 1，RSD=1.13%，表明仪具有良好的精密度。
3.6 重现性实验按供试品溶液制备方法制备同一批号供试品(批号：1)5份，依次进样测定，用测定值的相对偏差反映测定结果的重现性。结果表明，本法具有良好的重现性。
3.7 稳定性实验制备供试品溶液(批号：2)1份，在0，1，2，4，6，8，12，24 h进样，测定，结果表明：在24 h内供试品溶液中盐酸小檗碱含量基本稳定。
3.8 回收率实验精密称取已知含量的供试品(批呈：1，盐酸小檗碱平均含量97.235 6 μg/丸)1.0 g，共取5份，精密加入对照品溶液(盐酸小檗碱浓度：22 μg/ml)1 ml，依法规定。结果表明，盐酸小檗碱平均回收率99.882%(RSD=1.20%)，证明本法测定结果准确、可靠。
4 结论
4.1 浸膏提取工艺，水为提取溶剂，回流提取2次，均为2 h/次。第1次加水为药材用量的10倍，第2次为药材用量的8倍。
4.2 挥发油提取时，将药材适当粉碎成粗粉(<20目)后，加热回流6 h，挥发油收量较多。
4.3 制备水丸时，用75%乙醇为润湿剂，大约加入处方量的25%~28%，所制丸块较好。
4.4 用HPLC测定本品中盐酸小檗碱的含量，快速、结果准确而可靠。色谱条件：乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢胺(内含0.33%三乙胺，用磷酸调节pH值至2.5)(35∶65)流动相，流速1.0 ml/min，检测波长345 nm。本品盐酸小檗碱的含量为97.915 9 μg/丸(>0.045%)，平均回收率为99.882%(RSD=1.20%)。
参考文献：
[1]国家药典委员会,中国药典，Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2000：附录ⅥB.
(吉林省延边大学医学院 133000)
作者简介：金明玉(1965)，女(朝鲜族)，吉林延吉人，现任吉林省延边大学医学院副教授，硕士学位，主要从事中医方剂学与中医妇科学教学工作., 百拇医药(金明玉， 尹寿玉)