体外诱导人脐血CD34 + 细胞向肝细胞的分化
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张芳婷,叶 静,万汇涓,龙 霞,聂李平,于 洁,房家智
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张芳婷,叶 静,万汇涓,龙 霞,聂李平,于 洁,房家智
北京大学深圳医院中心实验室
【关键词】
脐血CD34 + 细胞;肝细胞;分化
【发表年期页】
2006,2; 143-146
【摘要】
目的 探讨在体外培养条件下人脐血CD34 + 细胞向肝细胞的分化。方法 用磁性细胞分选试剂盒(MACS) 分
离出CD34 + 细胞后在含50 mL/ L FBS ,1 ×ITS ,4. 7 mg/ L 亚油酸,10 - 4mol/ L 22磷酸抗坏血酸的低糖型DMEM 中培
养,并以FGF4 (100μg/ L) 、HGF (20μg/ L) 进行诱导。分别于生长因子刺激前和刺激8 、16 d 时留取细胞。通过
RT2PCR对ALB、AFP、GATA24 等mRNA 的表达水平进行检测;用免疫细胞化学染色检测ALB 蛋白的表达,并收集
培养液测定ALB 的质量浓度。结果 流式细胞仪检测结果显示CD34 + 细胞的平均分离纯度 90 % ,达到分离要求。
RT2PCR 检测到诱导后的CD34 + 细胞表达ALB、AFP、GATA4 mRNA。免疫细胞化学染色可见诱导16 d 的CD34 +
细胞出现ALB 阳性表达细胞,EL ISA 检测表明诱导组8 、16 d 培养液中的ALB 质量浓度明显增高,与诱导前和未诱
导组相比均有显著差异( P < 0. 01) 。结论 在体外培养条件下,脐血CD34 + 造血干细胞可分化为表达白蛋白的类肝
细胞。
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