丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA 文库的扩增、纯化和鉴定
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刘 敏 ,张 伟 ,陈天艳 ,蔺淑梅 ,赵 良 ,刘锦锋 ,
丙型肝炎病毒核心蛋白;酵母双杂交;cDNA文库,丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定
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参见附件(381KB，4页)。
刘 敏 ,张 伟 ,陈天艳 ,蔺淑梅 ,赵 良 ,刘锦锋 ,赵英仁 ,张树林
西安交通大学医学院第一附属医院传染科
【关键词】
丙型肝炎病毒核心蛋白;酵母双杂交;cDNA 文库
【发表年期页】
2006,1; 20-23
【摘要】
目的 用含丙型肝炎病毒核心( HCV core) 蛋白的cDNA 片段构建酵母双杂交诱饵载体,并进行人胎肝cDNA
文库的扩增、纯化和鉴定。方法 PCR 扩增含HCV core 蛋白不同大小的cDNA 片段,分别克隆入pUC19 质粒,经测
序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体p GBKT7 中。扩增人胎肝cDNA 文库并纯化、鉴定。结果 获得含HCV
core 蛋白的cDNA 片段,并成功克隆入p GBKT7 中。待转化的人肝cDNA 文库滴度在5 ×108 左右,纯化后的质粒
DNA 质量浓度约1 g/ L 。用EcoR Ⅰ、X ho Ⅰ双酶切显示插入片段大小不一。结论 成功构建了核心蛋白的酵母双杂
交诱饵载体;扩增、纯化的人胎肝cDNA 文库的多样性很好,适合于筛选。为用酵母双杂交技术研究与HCV core 蛋
白相互作用的蛋白打下坚实基础。
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