丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA 文库的扩增、纯化和鉴定

http://www.100md.com 刘　敏 ,张　伟 ,陈天艳 ,蔺淑梅 ,赵　良 ,刘锦锋 ,

鍏抽敭璇嶏細丙型肝炎病毒核心蛋白;酵母双杂交;cDNA文库,丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定

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     刘 敏 ,张 伟 ,陈天艳 ,蔺淑梅 ,赵 良 ,刘锦锋 ,赵英仁 ,张树林

    西安交通大学医学院第一附属医院传染科

    【关键词】

    丙型肝炎病毒核心蛋白;酵母双杂交;cDNA 文库

    【发表年期页】

    2006,1; 20-23

    【摘要】

    目的 用含丙型肝炎病毒核心( HCV core) 蛋白的cDNA 片段构建酵母双杂交诱饵载体,并进行人胎肝cDNA

    文库的扩增、纯化和鉴定。方法 PCR 扩增含HCV core 蛋白不同大小的cDNA 片段,分别克隆入pUC19 质粒,经测

    序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体p GBKT7 中。扩增人胎肝cDNA 文库并纯化、鉴定。结果 获得含HCV

    core 蛋白的cDNA 片段,并成功克隆入p GBKT7 中。待转化的人肝cDNA 文库滴度在5 ×108 左右,纯化后的质粒

    DNA 质量浓度约1 g/ L 。用EcoR Ⅰ、X ho Ⅰ双酶切显示插入片段大小不一。结论 成功构建了核心蛋白的酵母双杂

    交诱饵载体;扩增、纯化的人胎肝cDNA 文库的多样性很好,适合于筛选。为用酵母双杂交技术研究与HCV core 蛋

    白相互作用的蛋白打下坚实基础。

    http://www.100md.com/html/DirDu/2006/07/26/12/42/31.htm

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