牙龈卟啉菌蛋白酶rgpAcd 基因表达载体的构建
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许 静 ,李 昂 ,苟建重 ,许援朝 ,饶国洲 ,刘 蒸 ,
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许 静 ,李 昂 ,苟建重 ,许援朝 ,饶国洲 ,刘 蒸 ,谢红帼
西安交通大学医学院附属口腔医院
【关键词】
牙龈卟啉菌;蛋白酶;表达载体
【发表年期页】
2006,2; 157-160
【摘要】
目的 构建牙龈卟啉菌蛋白酶rgpA 催化结构域( rgpAcd) 基因的表达载体。方法 利用PCR 技术和基因重组
技术,克隆牙龈卟啉菌蛋白酶rgpAcd , 插入中介载体pMD182T 中并测序鉴定。将目的基因片断插入原核表达载体
p ET215b ,构建表达质粒p ET215b/ rgpAcd ,通过限制性酶切鉴定。结果 PCR 产物电泳结果显示,在大约1. 5 kb 处
有一特异的条带,与预期的大小一致,核酸序列测定与分析的结果表明,克隆的1 476 bp 基因序列与GenBank 数据库
中的序列呈现100 %同源性,未发生任何突变;构建的表达质粒经酶切后所得片断与预期大小一致,表明牙龈卟啉菌
蛋白酶rgpAcd 基因的表达载体构建成功。结论 成功克隆了牙龈卟啉菌rgpAcd 基因并构建了表达载体,为进一步
研制重组活载体疫苗奠定了基础。
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