蛋白质组分析在医学中的应用
蛋白质组,1蛋白质组和蛋白质组学,2蛋白质组学常用技术,3蛋白质组在疾病研究中的应用,参考文献
随着人类基因组计划(HGP)的实施和完成，基因研究以近顶峰而进入后基因时代，后基因组研究以基因组学为中心，同时分化出代表生命科学不同侧面的多种“组学”研究，如蛋白质组学(proteome)、药物基因组学、比较基因组学等[1]，在这些领域中蛋白质作为生命活动的“执行者”，参与了DNA的合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程，已经成为新的研究焦点。1 蛋白质组和蛋白质组学
蛋白质组(proteome)是指一个细胞一生中表达蛋白质的总合，细胞一生中包括细胞的各个生长时期、分化阶段以及受外界因子刺激状态等，这种定义的蛋白质组又称功能蛋白质组，与之相应的结构蛋白质，即基因组理论上编码的蛋白质组[2]。
蛋白质组学(proteomics)是研究蛋白质组的一个新的领域，主要研究蛋白质特性，包括蛋白质的表达水平、氨基酸序列、翻译后加工和蛋白质的相互作用，在蛋白质水平上了解细胞的多种功能及各种生理生化过程以及疾病的病理过程[3]。蛋白质组学的研究较基因组的研究复杂，这主要表现在：蛋白质由20种氨基酸结构排列而成，而核酸仅有四种核苷酸排列而成，另外，特别是在高等动物体内，转录后修饰和变异连接能显著的把从DNA水平获得的信息模糊化[4]。基因的产物是蛋白质，生物的表型通过蛋白质体现，对于某些基因由于转录后加工和翻译后加工，一个基因有着一个以上的蛋白产物，很多疾病不是由于基因，而是蛋白质的结构、功能、定位或表达发生变化[5]。
2 蛋白质组学常用技术
2.1 蛋白质的分离技术 (1)蛋白质双向电泳(two dimensional electricphresis 2DE)是蛋白质组学研究的支撑技术，是一种方便、灵敏的蛋白质分离方法[6]，第一相电泳根据蛋白质不同等电点分离各种蛋白质即等电聚焦电泳(IEF)。第二相电泳根据蛋白质不同分子量进一步分离等电点相同的蛋白质，即SDS聚丙烯酰胺凝焦点泳(SDSPAGE)。电泳完成后的染色方法主要有考马斯亮蓝染色、银染和荧光染色等，考马斯亮蓝染色的灵敏度为微克级，银染的灵敏度可达纳克级，新的荧光染料SYPRO染色的灵敏度可达到更高。双向电泳图谱反映了蛋白质组的特性，即蛋白质的种类和含量。双向电泳图谱复杂，它的分析通常依赖于软件分析。目前已有的蛋白质组双向电泳图谱资料包括转化的羊膜表面细胞、外周血单核细胞、胚肺成纤维细胞以及其他一些人类组织和肿瘤的蛋白质组双向电泳图谱[6]。(2)双向高效液相层析(2DHPLC)也是一种很好的蛋白质分离纯化技术 ......
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