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编号:11155484
纳米金增效微重量法核酸检测的研究
http://www.100md.com 《分析化学》 2006年第8期
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     摘要 用纳米金增效以提高微重量法检测核酸的灵敏度。实验研究了纳米金粒径大小对核酸探针固定的表面密度的影响以及探针密度对靶核酸杂交效率的影响。研究表明,核酸检测灵敏度与纳米金的粒径大小有密切关系。与粒径为5、15 nm的纳米金相比,用粒径25 nm的纳米金可以获得较高的杂交效率,检测的灵敏度也较高。本实验方法检测核酸的线性范围为0.05~1.2×10-6 mol/L;检出限为1.0×10-8mol/L。

    关键词 纳米金,核酸检测,石英晶体微天平,杂交

     1 引言

    随着分子生物学和医学的发展,人们对核酸的检测提出了更高的要求。微重量法检测核酸具有灵敏、快速、无需标记、污染少等特点,其应用日益受到人们的重视[1]。纳米金具有良好的稳定性、小尺寸效应、表面效应、光学效应以及特殊的生物亲和效应,使得纳米金在核酸检测中有着广泛的用途[2]。在微重量法中用纳米金来提高核酸检测的灵敏度以成为近年来研究的一个热点。刘涛等[3]在石英微天平的晶体的金表面组装一层纳米金,发现纳米金能显著增强核酸探针的固定进而提高靶核酸检测的灵敏度。本实验利用微重量法研究了纳米金粒径大小对所固定的核酸探针密度的影响,并由此探讨了探针密度对靶核酸杂交的影响。

     2 实验部分

    2.1 试剂与仪器

    1,6己二硫醇(分析纯,Fluka公司);巯基修饰核酸探针:5′HS(CH2)6TACTGGGATAGGATTAT3′;靶核酸:5′ATAATCCTATCCCAGTA3′(上海生工) ......

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