葛根芩连配方颗粒标志性成分含量分析及指纹图谱研究
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摘要 采用反相高效液相色谱法二极管阵列检测器，以甲醇水(内含1%三乙胺、1%乙酸，用磷酸调pH至3)为流动相，对中药复方制剂葛根芩连配方颗粒中3种主要标志性成分的含量同时分析测定，并采用相同的流动相对其指纹图谱进行研究。实验结果显示，3种主要标志性成分葛根素、黄芩苷和小檗碱在含量分析测定条件下，各组分分离良好，相关系数均为0.9999，线性范围分别为0.042~1.05、0.13~3.25和0.060~150 μg，加样回收率在95%～106%之间；在指纹图谱研究中，以黄芩苷为参照物峰，标定了32个共有峰，分析的11批葛根芩连配方颗粒与共有模式之间具有良好的相似性，相似度均在0.9以上。建立的含量测定及指纹图谱分析方法灵敏度高、专属性强，可用于葛根芩连配方颗粒的质量控制。关键词 反相高效液相色谱法，二极管阵列检测器，葛根芩连配方颗粒，指纹图谱
1 引言
葛根芩连汤原载于东汉张仲景《伤寒论》中，是经典古方之一，其处方为：葛根半斤、甘草二两(炙)、黄芩三两、黄连三两。方中葛根为君药，黄芩、黄连为臣药，炙甘草为使药。葛根、黄芩和黄连中主要标志性成分分别为葛根素、黄芩苷和小檗碱。据报道[1,2]，葛根具有解热、解痉作用；黄连、黄芩对伤寒杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用，黄连还有止泻、镇痉作用。为了保证葛根芩连配方颗粒质量，有必要对以上3个标志性成分进行含量分析及指纹图谱研究。目前葛根芩连制剂分析方法多采用不同的流动相分别测定主要成分葛根素、黄芩苷和小檗碱含量[3~5]，葛根芩连配方颗粒中3种主要标志性成分同时测定尚未见文献报道。中药复方制剂成分复杂，成分间相互干扰大，且主要标志性成分类别不同，葛根素为异黄酮C糖苷类，黄芩苷为黄酮糖醛酸苷类，小檗碱为原小檗碱类。本实验采用高效液相色谱法，同时测定葛根芩连配方颗粒中主要标志性成分葛根素、黄芩苷和小檗碱的含量，并对其指纹图谱进行研究，标定了32个共有峰。分析方法省时简便，为葛根芩连制剂的质量控制及进一步深入研究提供了方便。
2 实验部分
2.1 仪器和试药
1100高效液相色谱仪，包括G1315B紫外可见光二极管阵列检测器(美国安捷伦公司)；Delta320S pH计(METTLER TOLEDO) ......
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