中华医学会第九次全国心血管病学术会议(六)
通络方剂抑制炎症、保护内皮、稳定斑块、抗心律失常机制研究进展
通心络抑制IL-1β介导的小型家猪冠状动脉痉挛的作用及机制(3)
中国医科大学 曾定尹 关启刚
(续8月31日第20版)
病理学检测
对照组包裹吸附IL-1β纸巾处冠脉血管段管壁不光滑、内膜增厚、管腔狭窄。通心络组包裹吸附IL-1β纸巾处冠脉血管段内膜增厚及管腔狭窄程度较对照组明显减轻(见表2、图3,刊于8月31日第20版)。
各组Rho激酶mRNA表达情况
通心络组包裹IL-1β血管段表达少量Rho激酶(与β-肌动蛋白表达水平光密度比值为71.5%±2.4%);对照组包裹IL-1β痉挛血管段Rho激酶mRNA表达明显上调(98.2%±7.7%)。通心络组与对照组相比,P <0.05(见图4,图5)。
, 百拇医药
MBS-P的蛋白印迹法检测结果
通心络组包裹IL-1β血管段MBS-P水平很低(灰度值为16633±1390);对照组包裹IL-1β痉挛血管段MBS-P水平明显升高(25485±4745)。通心络组与对照组相比,P <0.05(见图6、图7)。
讨 论
冠状动脉粥样硬化斑块的不稳定性和冠状动脉痉挛是急性冠状动脉综合征发病机制中的关键。有效防治冠状动脉痉挛,可以保护和改善血管内皮功能,改善冠状动脉微循环,从而改善心肌缺血状态。
通心络是在中医络病理论指导下组方的通络复方制剂,其主要成分为人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、冰片等,具有化瘀通络和搜风解痉之功效。
研究表明,通心络可明显升高一氧化氮(NO)水平,降低血浆内皮素(ET)水平,改善内皮舒张功能。大量临床研究证明,通心络具有解除冠状动脉痉挛、保护和改善血管内皮功能,改善心肌缺血的独特疗效。贾真等研究支持,通心络胶囊能缓解冠心病患者变异型心绞痛的临床症状,有提高一氧化氮(NO)水平和降低内皮素(ET)水平的作用。初步实验研究发现,通心络对垂体后叶素诱发的大鼠冠状动脉痉挛性心肌缺血具有抑制作用。本研究以炎症因子(IL-1β)介导构建冠状动脉粥样硬化动物模型,并以5-羟色胺诱发其冠状动脉痉挛。研究结果发现,通心络具有明显抑制5-羟色胺诱发的小猪冠状动脉痉挛的作用。
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目前认为,冠状动脉痉挛主要由钙(Ca2+)调素途径、蛋白激酶C(PKC)途径和Rho激酶途径等三种主要途径所致,而Rho激酶途径被认为是引起急性冠脉综合征(CAS)持续状态的最重要因素。近来研究表明,Rho激酶可下调内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)的活性,减少NO的合成,从而增强冠状动脉痉挛。
Rho被确认为是Ras超家族中的一个亚群,分子量为20~30 kDa,由约200~300个氨基酸组成,是细胞内具有信号转导和分子开关功能的多肽类物质,Rho激酶是其下游效应器。晚近发现,Rho激酶信号传导途径与冠状动脉痉挛密切相关。Rho激酶促进肌球蛋白结合亚基磷酸化(MBS-P),抑制了肌球蛋白磷酸酶(MLCP)的活性,从而使磷酸化的肌球蛋白轻链(MLC)不能脱磷酸,致使冠状动脉易于发生痉挛。
动物实验业已证明,给予Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔,可以抑制5-羟色胺诱发的冠状动脉痉挛。Rho激酶参与冠状动脉痉挛也得到了临床研究的证实。研究者分离冠状动脉搭桥术患者的左内乳动脉并剥脱内膜,在诱发其痉挛实验中,给予Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔,可明显抑制血清素诱发的血管痉挛反应。给血管痉挛性心绞痛患者冠脉内注射法舒地尔可减弱冠状血管对乙酰胆碱(Ach)的收缩反应。
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本研究发现,对照组痉挛冠脉血管段Rho激酶mRNA的表达及MLCP的MBS-P水平明显上调,而通心络能明显抑制Rho激酶mRNA的表达,明显降低MLCP的MBS-P水平,从而减少病变血管段平滑肌收缩性,抑制5-羟色胺诱发的冠状动脉痉挛。因此我们认为,通心络抑制5-羟色胺诱发的冠状动脉痉挛可能是通过抑制细胞内Rho激酶的表达,减少MBS-P 的水平来实现的。
参考文献
1. 张子新,曾定尹,王绽菲,等. 通心络对血管成形术后家兔丝裂霉素活化蛋白激酶表达的影响. 中华心血管病杂志,2003,319:690-692.
2. 韩会萍,张秀荣. 通心络胶囊对不稳定型心绞痛患者内皮功能的影响. 现代中西医结合杂志,2004,13:307.
3. 文丹,郭道保,童朝辉. 通心络胶囊对冠心病心绞痛患者内皮功能及血镁的影响. 中国中医急症,2004,13:222-223.
, http://www.100md.com
4. 肖文良,戴华,姜志安. 通心络胶囊对不稳定性心绞痛患者血管内皮细胞保护作用的研究. 中华心血管病杂志,2002,30:268.
5. 贾真,顾复生. 通心络胶囊对血管内皮功能的影响. 中国医学论坛报,2003,3:21.
6. 吴以岭,主编. 络病学. 北京:中国科技出版社,2004,10,第一版.
7. Somlyo AP, Somlyo AV. Signal transduction by G-protein, Rho-kinase and protein phosphatase to smooth muscle and non-muscle myosin Ⅱ. J Physiol, 2000, 522: 177-185.
8. Alexander JS.Rho, Tyrosine Kinase, Ca2+, and Junctions in Endothelial Hyperpermeability. Circ Res, 2000, 87: 268-271.
, http://www.100md.com
9. Kj?諂ller L, Hall A. Signaling to Rho GTPases. Exp Cell Res, 1999, 253: 166-179.
10. 11. Leung T, Manser E, Tan L, et al. A Novel Serine/Threonine Kinase Binding the Ras-related RhoA GTPase Which Translocates the Kinase to Peripheral. J Biol Chem, 1995, 270: 29051-29054.
11. Somlyo AV. New Roads Leading to Ca2+ Sensitization. Circ Res. 2002,91: 83-84.
12. Iizuka K, Yoshii A, Samizo, et al. A major role for the Rho-associated coiled coil forming protein kinase in G-protein-mediated Ca2+ sensitiatzation through inhibition of myosin phosphated in rabbit trachea. Br J Pharmacol, 1999, 128: 925-933.
, 百拇医药
13. Masumoto A, Mohri M, Shimokawa H, et al. Suppression of Coronary Artery Spasm by the Rho-Kinase Inhibitor Fasudil in Patients With Vasospastic Angina. Circulation, 2002, 105: 1545-1547.
14. Kandabashi T, Kunihiro I, Mukai Y, et al. Rho-Kinase Plays an Important Role for Vascular Smooth Muscle Contraction of Atherosclerotic Human Arteries. Circulation, 2001, 104 (supplⅡ): Ⅱ-298.
15. Kandabashi T, Shimokawa H, Mukai Y, et al. Involvement of Rho-Kinase in Agonists-Induced Contraction of Arteriosclerotic Human Arteries. Ar Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2002, 22: 243-248.
, 百拇医药
16. Masumoto A, Mohri M, Shimokawa H, et al. Suppression of Coronary Artery Spasm by the Rho-Kinase Inhibitor Fasudil in Patients With Vasospastic Angina. Circulation, 2002, 105: 1545-1547.
17. Shimokawa H, Mohri M, Masumoto A, et al. Rho-Kinase Inhibitor Suppresses Coronary Artery Spasm in Humans. Circulation, 2001, 104(supplⅡ):Ⅱ-601.
18. Shimokawa H, Iinuma H, Kishida H, et al. Antianginal Effect of Fasudil, a Rho-Kinase Inhibitor, in Patients with Stable Effort Angina: A Multicenter Study. Circulation, 2001, 104(supplⅡ): Ⅱ-601.
, http://www.100md.com
曾定尹教授
中国医科大学附属第一医院教授、主任医师、博士生导师,国务院特殊津贴获得者。
现任中华医学会心血管分会常务委员、冠心病动脉粥样硬化学组组长,辽宁省心血管学会主任委员、中国高血压联盟理事、中华心血管病杂志编委。
主要科研方向为冠心病与动脉粥样硬化防治研究。
从事医教研工作43年,1995年创建了辽宁省第一个心血管病专业博士点,是辽宁省第一个博士生导师,培养博士生31名、硕士生38名。
先后完成国家“八五”、“九五”、“十五”攻关协作课题“关于ACEI长期治疗高血压的临床研究”、“心脑血管病危险因素的进一步研究”等5项课题,获国家自然科学基金资助课题1项,省重点课题多项。特别对中草药(粉防己碱、通心络、血脂康)抗动脉粥样硬化和心肌缺血的研究取得系列成果。获国家、省市级科技奖7项,主编、参编著作7部,发表论文100余篇。目前正承担国家“973”课题子课题1项。, 百拇医药
通心络抑制IL-1β介导的小型家猪冠状动脉痉挛的作用及机制(3)
中国医科大学 曾定尹 关启刚
(续8月31日第20版)
病理学检测
对照组包裹吸附IL-1β纸巾处冠脉血管段管壁不光滑、内膜增厚、管腔狭窄。通心络组包裹吸附IL-1β纸巾处冠脉血管段内膜增厚及管腔狭窄程度较对照组明显减轻(见表2、图3,刊于8月31日第20版)。
各组Rho激酶mRNA表达情况
通心络组包裹IL-1β血管段表达少量Rho激酶(与β-肌动蛋白表达水平光密度比值为71.5%±2.4%);对照组包裹IL-1β痉挛血管段Rho激酶mRNA表达明显上调(98.2%±7.7%)。通心络组与对照组相比,P <0.05(见图4,图5)。
, 百拇医药
MBS-P的蛋白印迹法检测结果
通心络组包裹IL-1β血管段MBS-P水平很低(灰度值为16633±1390);对照组包裹IL-1β痉挛血管段MBS-P水平明显升高(25485±4745)。通心络组与对照组相比,P <0.05(见图6、图7)。
讨 论
冠状动脉粥样硬化斑块的不稳定性和冠状动脉痉挛是急性冠状动脉综合征发病机制中的关键。有效防治冠状动脉痉挛,可以保护和改善血管内皮功能,改善冠状动脉微循环,从而改善心肌缺血状态。
通心络是在中医络病理论指导下组方的通络复方制剂,其主要成分为人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、冰片等,具有化瘀通络和搜风解痉之功效。
研究表明,通心络可明显升高一氧化氮(NO)水平,降低血浆内皮素(ET)水平,改善内皮舒张功能。大量临床研究证明,通心络具有解除冠状动脉痉挛、保护和改善血管内皮功能,改善心肌缺血的独特疗效。贾真等研究支持,通心络胶囊能缓解冠心病患者变异型心绞痛的临床症状,有提高一氧化氮(NO)水平和降低内皮素(ET)水平的作用。初步实验研究发现,通心络对垂体后叶素诱发的大鼠冠状动脉痉挛性心肌缺血具有抑制作用。本研究以炎症因子(IL-1β)介导构建冠状动脉粥样硬化动物模型,并以5-羟色胺诱发其冠状动脉痉挛。研究结果发现,通心络具有明显抑制5-羟色胺诱发的小猪冠状动脉痉挛的作用。
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目前认为,冠状动脉痉挛主要由钙(Ca2+)调素途径、蛋白激酶C(PKC)途径和Rho激酶途径等三种主要途径所致,而Rho激酶途径被认为是引起急性冠脉综合征(CAS)持续状态的最重要因素。近来研究表明,Rho激酶可下调内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)的活性,减少NO的合成,从而增强冠状动脉痉挛。
Rho被确认为是Ras超家族中的一个亚群,分子量为20~30 kDa,由约200~300个氨基酸组成,是细胞内具有信号转导和分子开关功能的多肽类物质,Rho激酶是其下游效应器。晚近发现,Rho激酶信号传导途径与冠状动脉痉挛密切相关。Rho激酶促进肌球蛋白结合亚基磷酸化(MBS-P),抑制了肌球蛋白磷酸酶(MLCP)的活性,从而使磷酸化的肌球蛋白轻链(MLC)不能脱磷酸,致使冠状动脉易于发生痉挛。
动物实验业已证明,给予Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔,可以抑制5-羟色胺诱发的冠状动脉痉挛。Rho激酶参与冠状动脉痉挛也得到了临床研究的证实。研究者分离冠状动脉搭桥术患者的左内乳动脉并剥脱内膜,在诱发其痉挛实验中,给予Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔,可明显抑制血清素诱发的血管痉挛反应。给血管痉挛性心绞痛患者冠脉内注射法舒地尔可减弱冠状血管对乙酰胆碱(Ach)的收缩反应。
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本研究发现,对照组痉挛冠脉血管段Rho激酶mRNA的表达及MLCP的MBS-P水平明显上调,而通心络能明显抑制Rho激酶mRNA的表达,明显降低MLCP的MBS-P水平,从而减少病变血管段平滑肌收缩性,抑制5-羟色胺诱发的冠状动脉痉挛。因此我们认为,通心络抑制5-羟色胺诱发的冠状动脉痉挛可能是通过抑制细胞内Rho激酶的表达,减少MBS-P 的水平来实现的。
参考文献
1. 张子新,曾定尹,王绽菲,等. 通心络对血管成形术后家兔丝裂霉素活化蛋白激酶表达的影响. 中华心血管病杂志,2003,319:690-692.
2. 韩会萍,张秀荣. 通心络胶囊对不稳定型心绞痛患者内皮功能的影响. 现代中西医结合杂志,2004,13:307.
3. 文丹,郭道保,童朝辉. 通心络胶囊对冠心病心绞痛患者内皮功能及血镁的影响. 中国中医急症,2004,13:222-223.
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4. 肖文良,戴华,姜志安. 通心络胶囊对不稳定性心绞痛患者血管内皮细胞保护作用的研究. 中华心血管病杂志,2002,30:268.
5. 贾真,顾复生. 通心络胶囊对血管内皮功能的影响. 中国医学论坛报,2003,3:21.
6. 吴以岭,主编. 络病学. 北京:中国科技出版社,2004,10,第一版.
7. Somlyo AP, Somlyo AV. Signal transduction by G-protein, Rho-kinase and protein phosphatase to smooth muscle and non-muscle myosin Ⅱ. J Physiol, 2000, 522: 177-185.
8. Alexander JS.Rho, Tyrosine Kinase, Ca2+, and Junctions in Endothelial Hyperpermeability. Circ Res, 2000, 87: 268-271.
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9. Kj?諂ller L, Hall A. Signaling to Rho GTPases. Exp Cell Res, 1999, 253: 166-179.
10. 11. Leung T, Manser E, Tan L, et al. A Novel Serine/Threonine Kinase Binding the Ras-related RhoA GTPase Which Translocates the Kinase to Peripheral. J Biol Chem, 1995, 270: 29051-29054.
11. Somlyo AV. New Roads Leading to Ca2+ Sensitization. Circ Res. 2002,91: 83-84.
12. Iizuka K, Yoshii A, Samizo, et al. A major role for the Rho-associated coiled coil forming protein kinase in G-protein-mediated Ca2+ sensitiatzation through inhibition of myosin phosphated in rabbit trachea. Br J Pharmacol, 1999, 128: 925-933.
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13. Masumoto A, Mohri M, Shimokawa H, et al. Suppression of Coronary Artery Spasm by the Rho-Kinase Inhibitor Fasudil in Patients With Vasospastic Angina. Circulation, 2002, 105: 1545-1547.
14. Kandabashi T, Kunihiro I, Mukai Y, et al. Rho-Kinase Plays an Important Role for Vascular Smooth Muscle Contraction of Atherosclerotic Human Arteries. Circulation, 2001, 104 (supplⅡ): Ⅱ-298.
15. Kandabashi T, Shimokawa H, Mukai Y, et al. Involvement of Rho-Kinase in Agonists-Induced Contraction of Arteriosclerotic Human Arteries. Ar Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2002, 22: 243-248.
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16. Masumoto A, Mohri M, Shimokawa H, et al. Suppression of Coronary Artery Spasm by the Rho-Kinase Inhibitor Fasudil in Patients With Vasospastic Angina. Circulation, 2002, 105: 1545-1547.
17. Shimokawa H, Mohri M, Masumoto A, et al. Rho-Kinase Inhibitor Suppresses Coronary Artery Spasm in Humans. Circulation, 2001, 104(supplⅡ):Ⅱ-601.
18. Shimokawa H, Iinuma H, Kishida H, et al. Antianginal Effect of Fasudil, a Rho-Kinase Inhibitor, in Patients with Stable Effort Angina: A Multicenter Study. Circulation, 2001, 104(supplⅡ): Ⅱ-601.
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曾定尹教授
中国医科大学附属第一医院教授、主任医师、博士生导师,国务院特殊津贴获得者。
现任中华医学会心血管分会常务委员、冠心病动脉粥样硬化学组组长,辽宁省心血管学会主任委员、中国高血压联盟理事、中华心血管病杂志编委。
主要科研方向为冠心病与动脉粥样硬化防治研究。
从事医教研工作43年,1995年创建了辽宁省第一个心血管病专业博士点,是辽宁省第一个博士生导师,培养博士生31名、硕士生38名。
先后完成国家“八五”、“九五”、“十五”攻关协作课题“关于ACEI长期治疗高血压的临床研究”、“心脑血管病危险因素的进一步研究”等5项课题,获国家自然科学基金资助课题1项,省重点课题多项。特别对中草药(粉防己碱、通心络、血脂康)抗动脉粥样硬化和心肌缺血的研究取得系列成果。获国家、省市级科技奖7项,主编、参编著作7部,发表论文100余篇。目前正承担国家“973”课题子课题1项。, 百拇医药