早期干预对脑损伤大鼠神经可塑性相关蛋白的影响
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摘要:目的研究早期干预对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠学习记忆能力及脑细胞中神经生长相关蛋白43(GAP43)表达的影响。方法选用SD大鼠建立宫内HIBD动物模型,随机分为HIBD干预组、HIBD非干预组和对照组,每组12只。HIBD干预组采取早期触摸和丰富环境刺激, HIBD非干预组与对照组常规饲养。干预28 d后,通过三等臂Y型迷宫试验检测大鼠学习记忆功能,而后取大鼠额皮质和海马组织,用免疫组织化学染色法检测GAP43表达情况。结果HIBD非干预组学习与记忆能力明显低于对照组(P<0.01), HIBD干预组Y迷宫测试成绩则优于HIBD非干预组(P<0.01)。同时, HIBD非干预组额皮质和海马神经元GAP43阳性系数高于对照组(P<0.01),而HIBD干预组GAP43的表达又明显高于HIBD非干预组(P<0.01)。结论早期干预具有改善HIBD大鼠认知能力的效果,其促进HIBD脑功能修复的作用与增加脑组织GAP43的表达有关。关键词:脑缺氧; 脑缺血; 早期干预; GAP43蛋白; 学习; 记忆; 大鼠
宫内窒息导致的缺氧缺血性脑损伤(HIBD)是新生儿常见病症,能够导致精神运动发育迟滞等后遗症,致残率很高,临床上对此尚无有效的治疗方法。研究表明,采用丰富环境刺激为主的早期干预疗法,能促进HIBD患儿神经功能康复,减轻神经系统后遗症\[12\]。为探讨早期干预究竟通过何种机制使受损脑神经功能修复,笔者模拟临床宫内窒息的情况,制备HIBD新生大鼠模型,观察施行早期干预前后HIBD大鼠认知能力,及脑神经细胞中神经生长相关蛋白43(GAP43)表达的变化,从神经可塑性角度探讨早期干预促进脑功能修复的作用机制。
1材料与方法
1.1动物分组及HIBD模型制备\[3\]选择孕21 d的SD母鼠15只(清洁级,福建医科大学实验动物中心提供,合格证号:医动字23010),临产时经吸入乙醚麻醉,剖腹结扎一侧子宫角血管,切下该侧子宫,置37 ℃水浴15 min后,剖宫取出胎鼠。依照文献\[4\]标准判断HIBD程度,再进行分组,将性别相同、体质量和HIBD程度相近的分入HIBD干预组与HIBD非干预组;另一侧子宫角血管不予结扎,剖宫取出胎鼠作为对照组,每组12只。3组均交给术前一日自然分娩的母鼠代哺育。
1.2干预方法HIBD干预组采取早期视触听觉刺激和丰富环境刺激\[5\]。剖宫产术后24 h开始用抚触刷从头至尾轻轻地摩擦,同时播放轻音乐,持续15 min,每日2次;第14 天大鼠睁眼后,再放入丰富环境(参照文献\[5\]方法设计),每日1 h;第22天大鼠断奶起全天放入丰富环境中,持续至第28天 ......
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