藏红T作为电化学探针线扫极谱法测定透明质酸
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摘要 在pH 1.5的BrittonRobinson(BR)缓冲溶液中,藏红T(ST)在-0.35 V(vs.SCE)处有一个灵敏的线性扫描二阶导数极谱还原波。当加入一定量的透明质酸(HA)后,由于此条件下ST带正电荷,而HA带负电荷,两者之间通过静电力作用形成一种生物超分子复合物,导致溶液中游离的ST的浓度降低,相应的还原峰电流降低。实验优化了结合反应条件和电化学测定条件。在最佳条件下,还原峰电流的降低值与HA的浓度在3.0~100.0 mg/L范围内呈线性关系,线性回归方程为Δip″(nA/s-2)=27.23 + 15.18C(mg/L)(n=14,r=0.996),本方法成功应用于HA模拟样品的测定。关键词 透明质酸,藏红T,极谱分析,结合反应
1 引言
透明质酸(HA)是人体内的生理性物质,具有高黏弹性、渗透性、独特的流变学特性以及良好的生物相容性,已被用于药品、化妆品、保健品、卫生用品等方面[1]。HA是由 (1→3)2乙酰氨基2脱氧β葡萄糖醛酸双糖重复单位所组成的直链多聚糖。常用测量HA的方法有生化法[2]、免疫法[3] 和分光光度法[4,5]等。刘绍璞等[4]采用分光光度法考察了碱性二苯基萘基甲烷染料与HA的相互作用并用于HA样品分析;焦庆才等[5]利用天青A光谱法测定了HA等多糖类物质。应用电化学分析的手段研究多糖类物质的报道相对较少。电化学分析是一种有效的分析方法,具有灵敏度高、线性范围宽、仪器价格便宜等优点,已应用于DNA、蛋白质、肝素钠等生物大分子的测定[6~9],但尚未见用于HA测定的报道。藏红T (ST)是一种吩嗪类阳离子有机染料,已用于DNA的光谱分析[10]。本实验以ST为电化学探针,利用其在酸性条件下能与HA发生相互作用而导致ST电化学信号变化的现象,用电化学分析方法对结合反应进行了研究,优化了结合条件和电化学检测条件 ......
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