地塞米松诱导体外培养星型胶质细胞凋亡机制的研究
地塞米松；星型胶质细胞；凋亡；P53；Bax；Bcl2,,地塞米松；星型胶质细胞；凋亡；P53；Bax；Bcl2,1材料和方法,2结果,3讨论,参
摘要：目的： 探讨地塞米松引起体外纯化培养的大鼠大脑皮质星型胶质细胞凋亡的机制。方法： 不同浓度的地塞米松(浓度为10-5、10-4、10-3mol/L)与纯化培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞共同孵育24小时后，用免疫细胞化学方法检测P53、Bax及Bcl2在星型胶质细胞内的表达情况，表达的强弱用平均光密度表示。结果： P53和Bax的表达随着地塞米松浓度的升高而增强，与对照组比较，各组均有极显著性差异(P<0.01),Bcl2的表达随着地塞米松浓度的升高先是增强而后减弱，与其他组比较10-3组有显著性差异(P<0.05)。结论： P53和Bax的表达增强可能是大剂量地塞米松引起星型胶质细胞凋亡的主要因素。关键词：地塞米松；星型胶质细胞；凋亡；P53；Bax；Bcl2
在哺乳动物的中枢神经系统内约有一千亿个神经元，而在这些神经元的周围又约有十倍以上的胶质细胞存在，其中以星型胶质细胞数量最多。传统观点认为，星型胶质细胞只对神经元起结构和功能上的支持作用，但近年来越来越多的证据表明，星型胶质细胞在中枢神经系统内扮演着更为积极和更为重要的角色，这也是胶质细胞成为神经领域研究热点的一个直接原因。糖皮质激素(glucocorticoid, GC)是一类具有神经活性的甾体激素，已有许多实验证实GC对神经元的生长、分化和凋亡都起重要的调节作用，但对胶质细胞的影响报道不多。已有报道证实大剂量的地塞米松可诱导体外培养的星型胶质细胞凋亡[1]，为进一步探讨其机制，我们做了如下研究。
1材料和方法
11材料
新生Wistar大鼠6只(由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供)；DMEM/F12培养基(GIBCO公司)；胎牛血清和小牛血清(GIBCO公司)；L谷氨酰胺(上海伯奥生物科技有限公司)；地塞米松(湖北恒生制药有限公司)；兔抗p53、Bax、Bcl2抗体(santa cruz公司)；SABC 免疫组化试剂盒及DAB试剂盒(北京中山公司)；24孔培养板(Corning公司)；HPIAS1000高清晰度彩色病理图文报告分析系统(同济千屏影像公司)；SL2300二氧化碳培养箱(美国Sheldon公司)；UFXII光学显微镜(日本Nikon公司)。
12方法
121星形胶质细胞的纯化培养将出生1~2天的新生Wistar大鼠用75%的酒精浸泡消毒后，采用无菌方法迅速取出大脑，用DHanks液清洗并剔除脑膜和血管，取大脑皮质，将组织剪碎为1mm3大小，用0.125%胰蛋白酶37℃消化数分钟 ......
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