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编号:11182242
http://www.100md.com 2006年9月28日 沈春琳 袁 东
    二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)的发展使得对蛋白质混合物的分离达到可重复性和高分辨率,使得定性和定量分析细胞或组织标本中的蛋白质成为可能。20世纪70年代随着软电离技术ESI(电喷雾电离)和基质辅助的激光解析电离化飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrum,MALDI-TOF-MS)技术的出现,质谱成为现代蛋白质科学中最重要和不可缺少的部分[19]。

    Lindahl等[20]就曾对过敏鼻炎哮喘患者NLF中的蛋白质进行分离,结果发现,与正常人相比,患者NLF中的CC-16蛋白减少而lipcortin-1升高,并且这两种蛋白质可能对过敏性鼻炎及哮喘发病发挥一定的作用。Ghafouri等[21]对吸烟者和非吸烟者NLF的蛋白质进行了研究。结果发现,与非吸烟者相比,吸烟者的NLF中克拉拉细胞分泌蛋白减少,脂皮质素-1变异修饰体、3种酸性形式的α1抗胰蛋白酶和1种磷酸化半胱氨酸蛋白酶增多。而且吸烟者的NLF富含较多的腭肺鼻上皮克隆(palate, lung and nasal epithelial clone,PLUNC),一种近来被识别的气道刺激标志物 [22]。这些结果显示,NLF的双向电泳结果可用于吸烟者NLF中表达蛋白变化的评估。克拉拉细胞分泌蛋白CC16,CC10和脂皮质素-1是两种抗炎及磷脂酶A2抑制蛋白,这些蛋白表达水平的改变对由吸烟引起的气道炎症而言非常重要。

    4 展望

    鼻灌洗方法易操作、无侵害性,指标客观可靠,具有广阔的应用前景。在NLF的蛋白组学研究中样品前处理过程主要包括三方面内容:① 去除高丰度蛋白质,提高对低丰度蛋白质的检测;② 降低体液样品中的盐浓度,提高等电聚焦效果;③ 尽可能分成多个组分