甾醇、甾烷醇柱前衍生高效液相荧光分析
2(9咔唑)乙酰氯,高效液相色谱,柱前衍生,甾醇,甾烷醇,,2(9咔唑)乙酰氯，高效液相色谱，柱前衍生，甾醇，甾烷醇,1引言,2实验部分,3结果与讨
摘要 采用荧光衍生化试剂2(9咔唑)乙酰氯，对天然产物谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇及谷甾烷醇的柱前衍生化条件，包括催化剂的种类、反应温度、衍生化时间等进行了考察，结果表明：催化剂选用三乙胺，反应温度80℃，时间20 min，衍生产物具有恒定的最大检测响应值。利用高效液相色谱对衍生产物进行分析，并对衍生物的分离进行了优化选择，达到了较好的基线分离，检出限为126～295 nmol/L。方法应用于血清样品的测定，谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和谷甾烷醇的标准加入回收率分别为1019%、1024%、1010%和1032%。关键词 2(9咔唑)乙酰氯，高效液相色谱，柱前衍生，甾醇，甾烷醇
1 引言
甾醇(即固醇)，主要包括谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇等，它们是一类在自然界大量存在的天然化合物[1]，但谷甾烷醇在自然界中仅少量存在，主要来源于化学合成[2,3]。甾醇、甾烷醇能有效降低血浆胆固醇浓度和降低冠心病的发生率，其临床应用前景十分广阔[4]，已广泛应用于食品、药品、保健品及化妆品等行业[5]。目前用于甾醇、甾烷醇类化合物分析的方法主要有薄层色谱法、可见光比色法、气相色谱法[6]和紫外检测高效液相色谱法[7]等，这些方法灵敏度较低，无法进行痕量测定。咔唑类衍生化试剂由于其分子中含有孤电子对的N原子，能发出较强的荧光，正日益受到重视[8,9]。2(9咔唑)乙酰氯主要用于伯胺、氨基酸等物质的衍生化[10]，具有较高的检测灵敏度，其用于伯醇、仲醇的衍生化未见报道。本实验利用所合成的2(9咔唑)乙酰氯，进行柱前衍生荧光检测甾醇、甾烷醇等仲醇化合物，不仅操作简便、衍生时间短，而且灵敏度高。谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇检测灵敏度分别是紫外检测高效液相色谱的31、40和33倍,并克服了谷甾烷醇分子中无发色基团 ......
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