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编号:11201542
配体交换毛细管区带电泳拆分未衍生化氨基酸
http://www.100md.com 《分析化学》 2006年第9期
手性配体毛细管电泳,手性分离,L谷氨酸,氨基酸,,手性配体毛细管电泳,手性分离,L谷氨酸,氨基酸,1引言,2实验部分,3结果与讨论,Referenc
     摘要 以铜(Ⅱ)L谷氨酸络合物为手性分离选择剂,对苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸3种非衍生芳香族氨基酸的手性对映体拆分进行了研究,建立了一种快速、简便拆分未衍生化的氨基酸对映体的配体交换毛细管电泳方法。 在使用10 mmol/L NH4AC(pH 50),5 mmol/L CuSO4和10 mmol/L L谷氨酸的条件下,成功地拆分了苯丙氨酸、酪氨酸手性对映体;色氨酸手性对映体也得到部分分离;考察了电泳缓冲液组成、pH值等影响分离效果的因素。

    关键词 手性配体毛细管电泳,手性分离,L谷氨酸,氨基酸

     1 引言

    氨基酸是化学、生物、医药、农业、食品等领域的重要物质,是组成多肽、蛋白质的基本单元及代谢中的重要物质。氨基酸的手性拆分在多肽、蛋白质的研究、有机化学不对称合成、医药、食品以及生命的起源、发育、病变及衰老的研究中,均具有重要意义。在构成蛋白质的20种氨基酸中,只有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸3种芳香族氨基酸在紫外区有吸收,可用紫外光度法或紫外荧光法直接测定。长期以来,L氨基酸被认为是生物体内唯一的氨基酸存在形式,但上述3种芳香族氨基酸的D型光学异构体已被发现存在于人的尿液和血清中[1]。为了准确测定生物体内这些氨基酸的D型光学异构体的含量,必须建立相应的手性分离方法。分离氨基酸对映体的方法主要有高效毛细管电泳(HPCE)法、高效液相色谱(HPLC)法和气相色谱(GC)法。但GC的分离对象仅限于易挥发物质,HPLC则存在费用偏高、分离效率偏低等不足。毛细管电泳具有微量、灵敏和柱效高的特点,适合于氨基酸的手性分离。Altria[2]和Dzygiel[3]曾以α环糊精为手性选择剂,赵书林[4]等以羟丙基α环糊精为手性选择剂,Kuhn等[5]以手性冠醚为手性选择剂,采用毛细管电泳技术分离了这些氨基酸对映体。配体交换是分离手性氨基酸的一种较早的方法,而利用CE进行手性化合物分离分析的第一例就是建立在金属络合物配位体交换原理基础上的[6] ......

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