生物分子的毛细管电泳化学发光检测法研究
毛细管电泳,化学发光,生物分子,,毛细管电泳,化学发光,生物分子,1引言,2实验部分,3结果与讨论,References
摘要 根据某些氨基酸和蛋白质在碱性条件下具有能显著增强鲁米诺铁氰化钾体系化学发光信号的特性，对毛细管电泳化学发光法直接分离测定生物分子的可行性进行了研究。电泳所用缓冲溶液为25 mmol/L、含20 mmol/L鲁米诺的硼砂缓冲溶液；氧化试剂为20×10-4 mol/L铁氰化钾。在优化条件下，L精氨酸和胃蛋白酶可直接实现分离，其检出限(S/N=3)分别为13×10-4 mol/L和71×10-7 mol/L。通过对市售的3种L精氨酸标准样品进行分离分析研究，证明该方法可应用于L精氨酸标准样品的纯度分析。关键词 毛细管电泳, 化学发光, 生物分子
1 引言
氨基酸与蛋白质是构成生命体的重要的生物分子，其分离与检测在临床医学、药学、食品检验及生命科学的研究中具有十分重要的意义。
毛细管电泳(CE)技术是一种高效液相分离技术，具有高效、快速、灵敏、进样少、成本低等特点[1];而化学发光(CL)检测法由于灵敏度高、分析速度快、无需光源、结构简单等特点，也越来越受到人们的欢迎。CECL联用技术及其应用研究已成为当前分析化学领域的研究热点之一[2]。 目前，尽管CECL联用技术用于氨基酸和蛋白质的分析测定国内外已有一些报道[3~5]，但测定之前常常需要进行衍生处理,其过程繁琐、耗时，易引入杂质，且对低浓度分析物的定量标记也十分困难。因此，无需复杂衍生过程的生物分子直接检测方法令人关注[6]。在发现某些氨基酸和蛋白质具有能显著增强鲁米诺铁氰化钾体系化学发光信号特性的基础上，本实验以L精氨酸和胃蛋白酶为分析对象，研究了毛细管电泳化学发光联用技术直接分离测定氨基酸和蛋白质的可行性。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
高压电源(上海原子能研究所)；光电倍增管(北京滨松光子技术有限公司)；石英毛细管(河北永年光纤厂)；直流前置放大器(南京大学微弱信号检测中心)；千谱色谱工作站(上海千谱软件有限公司) ......
您现在查看是摘要页，全文长 7891 字符。