量子点标记链霉亲和素及其生物活性检测
量子点标记,链霉亲和素,竞争抑制反应,,量子点标记，链霉亲和素，竞争抑制反应,1引言,2实验部分,3结果与讨论,References
摘要 选用无机盐为前驱体,在水相中合成CdTe量子点,并用此量子点标记链霉亲和素，通过Sephadex G100 层析分离纯化量子点标记的链霉亲和素，采用磁颗粒标记的链霉亲和素与量子点标记的链霉亲和素竞争结合辣根过氧化酶标记的生物素，即酶联免疫竞争抑制分析法检测链霉亲和素标记量子点后的生物活性，计算约70.3%的链霉亲和素标记到量子点上，且具有生物活性。每毫克量子点大约可偶联0.14 mg的链霉亲和素。采用荧光光谱研究量子点标记前后的荧光变化，标记后量子点的最大发射波长蓝移了8 nm，而发射光谱的半峰宽基本不变，说明量子点与链霉亲和素结合后粒子没有团聚，分散性好。关键词 量子点标记，链霉亲和素，竞争抑制反应
1 引言
量子点(quantum Dots ,以下简称QDs) 是一种半导体纳米晶体,它具有优良的光谱特征和光化学稳定性。荧光半导体纳米材料作为荧光标记物与生物荧光染料相比具有宽的激发谱线范围、窄的发射谱线、发光效率高、发光颜色可调，并且光稳定性好等一系列优点[1～4]。因此,利用量子点作为生物荧光探针,在免疫生物学和临床检验学等研究中将会有广阔的应用前景。 生物素亲和素系统(biotinavidin system，BAS)是近几年来发展很迅速的一门生物学技术[5]。链霉亲和素(streptavidin，SA)是从链霉菌培养物中提取的一种蛋白，分子量为65 kD左右，其功能类似亲和素，有4个生物素结合点，与生物素结合具有高度的亲和力和特异性。基于生物素亲和素系统(BAS)的这些特性，国内外建立了多种免疫分析技术(BAS免疫组织化学技术、BAS分子生物学技术、BAS酶免疫技术、BAS时间分辨荧光免疫技术等)，使链霉亲和素在生物学、免疫学、临床医学等领域得到广泛应用[6]。
本实验采用无机盐为前驱体, 选用温和的条件在水相中合成表面包覆巯基乙酸的CdTe量子点，通过缩合剂碳二亚胺将量子点与链霉亲和素偶联，柱层析分离后，用荧光和紫外分光光度法检测CdTe量子点标记链霉亲和素前后光谱的变化。用酶联免疫分析法(ELISA)检测链霉亲和素连接量子点后的生物活性 ......
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