Status in the research of nucleic acid vaccine against toxoplasma in China.

    XU Feng-quan，LIN Ling.

    (Shandong Provincial Institute of Parasitic Diseases，Jining272133，Shandong，P.R.China)

    刚地弓形虫(简称弓形虫)呈世界性分布，哺乳动物及鸟类普遍易感。人类对弓形虫有较强的自然免疫力，感染后绝大多数无明显症状表现，或只出现亚急性弓形虫病。但在孕妇及免疫功能低下者(如ADIS病、器官或组织移植后接受免疫抑制剂治疗的病人等)感染弓形虫后引起的危害严重。人体弓形虫感染日益受到关注，弓形虫病疫苗成为当前研究的热点。动物实验发现，弓形虫全虫疫苗，弓形虫特异抗原组分疫苗有预防弓形虫感染或降低感染度作用，但前者可能会引起再感染，后者的免疫保护效果较差。弓形虫病核酸疫苗克服了上述疫苗存在的不足，具有良好的开发应用前景。我国从上世纪90年代后期开始了弓形虫病核酸疫苗的研制，通过对表达保护性抗原蛋白基因进行重组，先后研制出弓形虫基因单价疫苗、复合疫苗和混合疫苗。动物实验证明部分疫苗具有良好的免疫预防效果。

     1 保护性抗原及目的基因研究

    弓形虫裂殖了表面膜蛋白(SAG) [1，2] ，致密颗粒蛋白(GRA) [3] 和棒状体蛋白(ROP) [4] 是重要的弓形虫抗原，这些抗原物质与弓形虫的侵袭性有关，且能诱导宿主的免疫反应。

    1.1 SAG SAG是弓形虫裂殖子表面膜蛋白。通过对SAG的分子结构、生物学和免疫学特性研究发现，有5种(分别命名为P22、P23、P30、P35利P43)与弓形虫病免疫有关。

    1.1.1 P30(SAGl) P30分子质量30～35kDa含量约占虫体总蛋白的3%～5%，主要存在于弓形虫表膜及内膜系统，也可分泌到虫体外环境。P30是重要的弓形虫表面膜蛋白，与虫体的吸附和入侵有关，能被弓形虫急性感染期及恢复期血清抗体识别。动物实验证明，用纯化的P30蛋白免疫小鼠可显著提高小鼠抗弓形虫感染能力 [5] 。为提高免疫效果，于瑾等 [6] 构建了含有霍乱毒素A2/B亚基基因和P30基因的重组表达质粒，转化宿主菌BL2l后经IPTG诱导产生30-CTA2/B融合蛋白。游东生等 [7] 将P30重组表达质粒转化入DH5α，Westernblot证明IPTG诱导表达的P30抗原分子能被抗弓形虫血清识别。 ......