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编号:11332131
液相色谱质谱联用技术分析固相合成胸腺五肽及其副产物
http://www.100md.com 《分析化学》 2006年第12期
色谱质谱,合成多肽,固相合成,胸腺五肽,,色谱质谱,合成多肽,固相合成,胸腺五肽,1引言,2实验部分,3结果与讨论,References
     摘要 利用反相高效液相色谱(RPHPLC)与电喷雾质谱(ESIMS/MS)联用技术,分析用芴甲氧羰基(Fmoc)固相合成方法在WANG树脂上手工合成的胸腺五肽(H2NArgLysAspValTyrCOOH)粗产物,RPHPLC结果显示:合成粗产物含有一个主要成分,三个次要成分和多个微量成分;与之联用的电喷雾质谱同步得出相应的某些信息,可对各成分的结构进行分析。结果证明,粗产物中的主成分即为目标五肽,另外几个主要副产物为五肽合成过程中去保护未完全的副产物。

    关键词 色谱质谱,合成多肽,固相合成,胸腺五肽

     1 引言

    胸腺五肽[1](TP5)是胸腺生成素Ⅱ(thymopoietin Ⅱ)第32~36位的氨基酸残基片段,它的基本序列为HArgLysAspValTyrOH,保留了胸腺生成素的有效生物活性。固相合成技术是多肽和蛋白质合成的一个常用技术,广泛应用于蛋白质、多肽结构功能研究以及医药学研究领域中[2]。但固相合成多肽时伴有的一系列副反应影响了合成产物的纯度及收率。因此采用有效的方式对合成产物进行分离和鉴定[3~5],可以为改进合成条件、减少副反应、提高目标产物的纯度提供参考依据。本实验利用反相高效液相色谱电喷雾三级四极杆质谱联用技术分析了固相化学合成胸腺五肽粗产物,根据所得信息,对目标肽和可能的副产物进行推测,为提高目标肽收率提供依据。

     2 实验部分

    2.1 仪器与试剂HP1100型高效液相色谱仪(含DAD检测器)(美国Agilent公司);API2000型电喷雾三级四极杆质谱仪(美国ABI公司) ......

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