压电免疫传感器法检测蓖麻毒素
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摘要 利用纳米金对石英晶体微天平(QCM)的表面修饰和质量扩增效应，建立了一种压电免疫传感器检测蓖麻毒素的新方法。首先在石英晶体的金电极上依次自组装1，6己二硫醇和纳米金进行表面修饰，然后通过蛋白A定向固定蓖麻毒素多抗来制备敏感膜。利用纳米金的质量扩增效应设计了一种 “毒素单抗 蛋白A纳米金”复合物，成功实现了对蓖麻毒素的检测，提高了传感器灵敏度和特异性。该传感器对蓖麻毒素响应的线性范围为0.50～10 mg/L，回归方程为△F=45.81 Cricin+48.48(R=0.9986，N=10，P<0.01);检测灵敏度为45.81 Hz/(mg/L)。关键词 压电免疫传感器，纳米金，表面修饰，质量扩增效应，蓖麻毒素
1 引言
蓖麻毒素(ricin)是一种核糖体失活蛋白[1,2] ，对人和哺乳动物有剧毒，其毒性是神经毒剂VX的385倍，氰化物的6000倍[3]。一个毒素分子进入细胞，就足以使整个细胞的蛋白质合成完全停止而死亡，已被列为最有可能被用作恐怖袭击的生物战剂之一[3，4]。蓖麻毒素没有特殊的化学基团和元素，很难用一般的物理、化学和生化方法鉴别。中毒早期无特殊症状和病变，待发现中毒症状后，已难以治疗。因此，建立针对该毒素快速、可靠、灵敏的检测方法，对于应对蓖麻毒素的恐怖袭击及中毒治疗极为必要[5]。压电免疫传感检测是一种新型免疫检测手段。它结合了压电质量传感的高度灵敏性与免疫反应的高度特异性。该方法无需使用各种标记物，具有操作简单、检测快速、实时在线监测以及容易实现分析的自动化、微型化、集成化等优点，已广泛应用于医学诊断、食品卫生检验、环境监测等领域。纳米金溶胶是一种理想的纳米材料，具有优良的物化性质和生物相容性，常用于免疫检测、生物传感器等领域，可以达到提高检测灵敏度的目的。本研究利用所研制的微型压电传感检测系统[6]，将纳米金对QCM的表面修饰和质量扩增效应结合起来，设计了一种检测蓖麻毒素的新方法，提高了传感器的灵敏度，取得了满意的结果。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂微型压电免疫传感检测平台、USB接口的传感器芯片(10 MHz，检测池容积150 μL)及分析软件(由本课题组研制)。1，6己二硫醇(HDT，Fluka公司)； 蛋白A(SPA，Sigma公司)；牛血清白蛋白(BSA，芭尔芘生物技术发展中心)；蓖麻毒素、蓖麻毒素单抗、蓖麻毒素多抗(均为本实验室制备)；纳米金溶胶(直径20 nm，以柠檬酸三钠还原法制备)；Piranha液(H2SO4(98%)∶H2O2(30%)＝3∶1)；其它试剂均为分析纯 ......
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