荧光噻唑蓝法检测红色纳米硒的抗氧化活性
荧光法,罗丹明B,纳米硒,噻唑蓝,,荧光法,罗丹明B,纳米硒,噻唑蓝,1引言,2材料与方法,3结果与讨论,References
摘要 采用荧光法检测红色纳米硒的抗氧化性,并结合噻唑蓝法(MTT法)研究红色纳米硒抗氧化对细胞的作用。Fenton反应产生稳定羟自由基,罗丹明B为荧光指示剂,磷酸盐缓冲液中检测了纳米硒清除羟自由基的效果。再将纳米硒与肝细胞QSG7701共培养,检测了不同时期培养基的氧化还原状况,并用MTT实验检测作用后细胞生长情况。结果显示:纳米硒具有良好抗氧化作用,能有效改善培养基中的氧化还原环境,同时促进了细胞生长。关键词 荧光法,罗丹明B, 纳米硒, 噻唑蓝
1 引言
硒是动物营养的一种必须微量元素。近年来的研究发现它还是一些酶活性部位的基本组成部分[1~3]。这些酶有清除自由基、抗氧化的作用,能解除重金属的致癌性与毒害,减轻放射线、微波对人体的伤害。目前的研究主要集中在无机硒和有机硒的抗氧化性上,并且对它们的性质已经有了较为确切的结论。但相比其它形式的硒具有低毒高效、高免疫调节剂、高抗氧化、高吸收率特点的红色纳米硒,张劲松等[4,5]对其抗氧化性清除自由基的效果进行了一定的讨论,证明纳米硒在低浓度下表现有很好的清除自由基的能力。荧光法作为一种简便而实用的检测羟自由基的方法得到大家的关注[6~8]。而噻唑蓝(methylthianolyldiphenyltetrazolum bromide, MTT)实验[9]通过噻唑蓝对活细胞染色后用酶标仪测定的OD值大小反映活细胞量的多少,OD值越大说明活细胞越多,从而可用来检测处理前后细胞生长情况。因此,本研究利用荧光法检测了本实验室制备的纳米硒清除羟自由基的能力,并和抗坏血酸和亚硒酸钠清除羟自由基进行比较;利用MTT实验验证纳米硒对细胞生长情况的影响;两种方法相结合讨论纳米硒的抗氧化作用和生物学活性 ......
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