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编号:11332238
水溶性量子点荧光探针用于胃癌细胞相关抗原CA242的检测
http://www.100md.com 《分析化学》 2006年第12期
量子点,胃癌细胞,抗原,光稳定性,,量子点,胃癌细胞,抗原,光稳定性,1引言,2实验部分,3结果与讨论,References
     摘要 基于量子点荧光探针对胃癌细胞相关抗原CA242进行了检测。首先在水溶液中直接合成性能优良的量子点荧光纳米颗粒,并在其表面成功修饰了羊抗小鼠IgG和聚乙二醇,制得功能化的水溶性量子点荧光探针,并利用探针对胃癌细胞相关抗原CA242进行检测,进一步与传统的基于荧光染料标记的免疫荧光分析方法进行了比较。实验结果表明:该功能化的探针能够有效地识别胃癌细胞相关抗原CA242,并且在光稳定性和灵敏度方面都较传统的基于荧光染料标记的免疫荧光分析方法有明显的改善,从而为CA242的相关检测以及胃癌的诊断与愈后判断提供了新的方法。

    关键词 量子点,胃癌细胞,抗原,光稳定性

     1 引言

    CA242是一种肿瘤相关抗原,人体正常组织中含量极低甚至没有,当发生恶性癌变时,其表达明显上调[1,2]。该抗原在胃癌细胞和胃癌患者血清中均有表达,且与淋巴结转移具有一定的相关性,可作为判断胃癌播散潜力的生物学指标[3,4],对胃癌的诊断与治疗具有重要的指导意义。肿瘤相关抗原CA242的检测方法已有报道,如传统免疫荧光分析[5]、放射性标记[6]等。然而,在传统的免疫荧光分析技术中,有机荧光染料抗光漂白性能较差,且用于检测时灵敏度不高;放射性标记具有较高的灵敏度,但存在放射性同位素污染和防护等问题。因此,探索和发展特异性的非同位素标记方法用于CA242的相关检测,一直是科研人员十分关注的课题。量子点(quantum dots, QDs)是近年发展起来的一种新型荧光探针,与传统的有机荧光染料相比,具有极其优良的光谱性能[7,8]。其激发光谱较宽,不同的量子点可以由同一波长的光激发,而不同的有机荧光染料分子,则常常要用不同波长的光来分别激发。量子点不易漂白,发射光谱与粒径大小有关,通过调整其粒径大小,可以发出不同颜色的荧光,从而使不同生物分子的标记、区分、识别变得更加容易,在生物化学、细胞生物学、分子生物学等研究领域显示了极其广阔的应用前景[9~11]。针对CA242传统检测方法中所存在的抗光漂白性能差、放射性污染等问题,本研究基于量子点荧光探针对胃癌细胞相关抗原CA242进行了检测。首先制备出性能优异的量子点荧光纳米颗粒,并进一步在其表面修饰了羊抗小鼠IgG和聚乙二醇(PEG),其中PEG是一种生物相溶性分子,能够有效的降低颗粒的非特异性吸附现象[12]。基于该功能化的量子点荧光探针,成功地对胃癌细胞相关抗原CA242进行了检测。该方法特异性好,光稳定性强。

     2 实验部分

    2.1 仪器与试剂F2500荧光分光光度计(日本Hitachi公司);FV500IX70激光共聚焦荧光显微镜(日本Olympus公司);22R台式冷冻多功能离心机、DU800紫外/可见分光光度计(美国 Backman公司);3111CO2水套培养箱(美国 Forma公司) ......

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