正交实验研究葛根胶囊的最佳生产工艺
摘要：目的探讨葛根胶囊的最佳生产工艺。方法用正交实验法对葛根胶囊的生产条件进行优选。结果葛根胶囊的最佳生产工艺为：用8倍量溶媒、提取2次、每次80 min。结论此工艺适合葛根胶囊的大生产。
关键词：葛根胶囊； 葛根素； 正交实验
葛根胶囊是以《金匮要略》[1]中葛根汤而来，由葛根、麻黄、桂枝、芍药、炙甘草、生姜、红枣等中药组成，经过水提制成的胶囊，临床主治发热无汗、恶心、身病、项背强、口禁、便少等症。是历代医学所推崇的名方之一。传统的给药方法是水煎煮后分次服用，十分不方便，我们做成胶囊应用于临床，为保证制剂质量，用正交试验法研究了最佳生产工艺。
1 材料
1.1 药材 葛根、麻黄、桂枝、芍药、炙甘草、生姜、红枣购于安国中药材市场，符合《中国药典》(2005版)标准。
1.2 LC10ATvp高效液相色谱仪(生产厂家：日本岛津)；AG285电子天平(生产厂家：梅特勒-托利多仪器有限公司)；葛根素对照品购自中国药品生物制品检定所，(批号：0752-200209，含量测定用)；化学试剂：甲醇为色谱纯，其余为分析纯，水为去离子水。
2 设计
2.1 因素-水平的确定 传统的给药方法是水煎煮后分次服用，因此提取方法确定为水提法。本实验重点研究提取溶媒用量、提取时间、提取次数3个因素，每个因素3个水平。见表1。
表1 因素水平(略)
2.2 正交表的选用 本实验有3个因素，3个水平，故选用L9(34)正交实验。见表2。
3 方法与结果
3.1 样品的制备 因桂枝中含有挥发性成分，考虑到挥发性成分亦为中药活性成分，为防止水提取过程中挥发性成分的挥散损失，先以水蒸气蒸馏法收集挥发油；实验结果表明，加水10倍、浸泡1 h、加热回流提取5 h，挥发性成分基本提尽，挥发油平均收率为0.43%。药液过滤，滤液另器存放，药渣按比例加入其余6味药材，按表2的条件进行煎煮，药液过滤与提取挥发油的药液合并，经离心、取上清液、微孔滤膜过滤后，定容备用。
3.2 含量测定方法 葛根是方中的君药，所以选取葛根素含量指标，参照文献[2]含量测定方法检测。
3.3 总提取物的测定 精密量取样品溶液10 ml，置干燥至恒重的蒸发皿上，于水浴上蒸干，在105℃干燥3 h，移至干燥器中冷却30 min，迅速称定重量，计算提取率。
4 结果与讨论
以提取率和葛根素含量的乘积为综合评价指标，结果见表2；方差分析见表3。从极差R看，影响因素大小顺序为B>C>A，初步确定工艺为A3B3C2。由表3可知，因素B对评价指标有显著影响(P<0.05)，A、C有一定影响，但不显著。另外，从因素指标曲线可以看出：因素A随着溶媒量的增加提取率和葛根素含量有所增加，因素B随着提取时间的增加提取率和葛根素含量增加明显，但到60 min后增加较缓慢，因素C随着提取的增加提取率和葛根素含量也增加，但2遍与3遍影响不大，与方差分析结果一致。所以为经济合理，节约成本，确定最佳工艺为A2B3C2即溶媒用量8倍量、提取时间80 min、提取2次；按上述确定的工艺条件经过验证结果表明，此工艺稳定，具有重现性和可操作性，适合于大生产。
表2 正交实验与结果(略)
表3 方差分析(略)
F检验临界值：F0.01(2，2)=99.00；F0.05(2，2)=19.00
参考文献：
[1] 李文瑞.金匮要略汤证论治[M].北京：中国医药科技出版社，1993：4.
[2] 葛尔宁.RPHPLC法测定葛根汤中葛根素的含量及变化[J].中国实验方剂学杂志，2005，11(4)：12.
(石家庄以岭药业股份有限公司，河北 石家庄 050035), http://www.100md.com(李奉勤， 范文成， 史冬霞， 马振嗣， 韩月芝)
关键词：葛根胶囊； 葛根素； 正交实验
葛根胶囊是以《金匮要略》[1]中葛根汤而来，由葛根、麻黄、桂枝、芍药、炙甘草、生姜、红枣等中药组成，经过水提制成的胶囊，临床主治发热无汗、恶心、身病、项背强、口禁、便少等症。是历代医学所推崇的名方之一。传统的给药方法是水煎煮后分次服用，十分不方便，我们做成胶囊应用于临床，为保证制剂质量，用正交试验法研究了最佳生产工艺。
1 材料
1.1 药材 葛根、麻黄、桂枝、芍药、炙甘草、生姜、红枣购于安国中药材市场，符合《中国药典》(2005版)标准。
1.2 LC10ATvp高效液相色谱仪(生产厂家：日本岛津)；AG285电子天平(生产厂家：梅特勒-托利多仪器有限公司)；葛根素对照品购自中国药品生物制品检定所，(批号：0752-200209，含量测定用)；化学试剂：甲醇为色谱纯，其余为分析纯，水为去离子水。
2 设计
2.1 因素-水平的确定 传统的给药方法是水煎煮后分次服用，因此提取方法确定为水提法。本实验重点研究提取溶媒用量、提取时间、提取次数3个因素，每个因素3个水平。见表1。
表1 因素水平(略)
2.2 正交表的选用 本实验有3个因素，3个水平，故选用L9(34)正交实验。见表2。
3 方法与结果
3.1 样品的制备 因桂枝中含有挥发性成分，考虑到挥发性成分亦为中药活性成分，为防止水提取过程中挥发性成分的挥散损失，先以水蒸气蒸馏法收集挥发油；实验结果表明，加水10倍、浸泡1 h、加热回流提取5 h，挥发性成分基本提尽，挥发油平均收率为0.43%。药液过滤，滤液另器存放，药渣按比例加入其余6味药材，按表2的条件进行煎煮，药液过滤与提取挥发油的药液合并，经离心、取上清液、微孔滤膜过滤后，定容备用。
3.2 含量测定方法 葛根是方中的君药，所以选取葛根素含量指标，参照文献[2]含量测定方法检测。
3.3 总提取物的测定 精密量取样品溶液10 ml，置干燥至恒重的蒸发皿上，于水浴上蒸干，在105℃干燥3 h，移至干燥器中冷却30 min，迅速称定重量，计算提取率。
4 结果与讨论
以提取率和葛根素含量的乘积为综合评价指标，结果见表2；方差分析见表3。从极差R看，影响因素大小顺序为B>C>A，初步确定工艺为A3B3C2。由表3可知，因素B对评价指标有显著影响(P<0.05)，A、C有一定影响，但不显著。另外，从因素指标曲线可以看出：因素A随着溶媒量的增加提取率和葛根素含量有所增加，因素B随着提取时间的增加提取率和葛根素含量增加明显，但到60 min后增加较缓慢，因素C随着提取的增加提取率和葛根素含量也增加，但2遍与3遍影响不大，与方差分析结果一致。所以为经济合理，节约成本，确定最佳工艺为A2B3C2即溶媒用量8倍量、提取时间80 min、提取2次；按上述确定的工艺条件经过验证结果表明，此工艺稳定，具有重现性和可操作性，适合于大生产。
表2 正交实验与结果(略)
表3 方差分析(略)
F检验临界值：F0.01(2，2)=99.00；F0.05(2，2)=19.00
参考文献：
[1] 李文瑞.金匮要略汤证论治[M].北京：中国医药科技出版社，1993：4.
[2] 葛尔宁.RPHPLC法测定葛根汤中葛根素的含量及变化[J].中国实验方剂学杂志，2005，11(4)：12.
(石家庄以岭药业股份有限公司，河北 石家庄 050035), http://www.100md.com(李奉勤， 范文成， 史冬霞， 马振嗣， 韩月芝)