微柱凝胶配血不合的判定分析
[摘 要] 目的：探讨临床上配血不合的常见情形，为实际工作提供参考。方法：利用Diana半自动配血系统进行交叉配血，总结配血不合的常见情形。结果：常见的影响配血的因素主要有纤维蛋白含量过高、冷凝集素、自身凝集及IgG型抗体四种。结论：正确分析配血不合的情形，能增加临床输血的及时性和安全性。
[关键词] 微柱凝胶；配血不合；交叉配血
准确的交叉配血是临床安全输血的重要保证。以往的盐水配血法只能检测出血清中的完全抗体，微柱凝胶技术可检测出血清中的不完全抗体，有标本用量少、灵敏度高、特异性强、操作简便、结果可长期保存等优点[1]。由于其灵敏度高，因此在配血过程中常出现弱阳性的结果，若不能快速作出准确的判定，则会影响到临床输血的及时性和安全性。我们自2002年10月以来采用微柱凝胶技术配血，现将在使用过程中对遇到的弱阳性结果的判定报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
DianaGel Coombs卡、Diana半自动配血系统(包括加样仪、孵育器、专用离心机、读卡仪、清洗液等)、不规则抗体筛查谱细胞均由Diana公司提供，生理盐水、低离子液由本科自制。
1.2 检测对象
2002年10月至2005年10月在本院需要输血的住院或门诊患者8 454例。
1.3 标本处理
血液标本按以下的要求处理：常规EDTA抗凝血(抗凝剂与血液比例为1∶9)，血液加入试管后注意及时混匀。离心后血浆与血细胞分离清楚，血浆高度至少不小于1.5 cm，不能溶血。
1.4 方法及原理
微柱凝胶中含有一定量的抗人球蛋白，机器自动把患者和献血员的血浆和血细胞按一定比例加入到DianaGel Coombs卡中，经37 ℃的孵育器孵育后(仪器设置时间为15 min)，放在专用离心机离心(时间设置为9 min)。若患者血清中有完全或不完全抗体，完全抗体直接与相对应的血球表面抗原结合发生凝集，而不完全抗体则会致敏在献血员的血球上，再经微柱中的抗人球蛋白的搭桥，便凝集成大的凝集颗粒或结成块状，这些颗粒或块状在离心时无法通过微柱凝胶而留在凝胶的上端,为阳性结果，根椐微柱上面的凝块或微柱凝集颗粒的多少、散布的程度来判定阳性结果，不凝集的血球便完全沉到微柱的底部，为阴性结果。
2 结果与讨论
2.1 纤维蛋白含量过高影响判定结果18例
由于患者血液标本抗凝效果不佳，内含不易察觉的纤维蛋白，出现细胞“凝块”，这种假阳性凝集程度一般较弱，粘附一定量红细胞的纤维蛋白大多聚集在微柱的最上层，但颜色较淡，而大部分红细胞则沉积到微柱的底端，这种情况一般不难判断。因此为了防止血液凝固给实验带来不良影响，患者血液抽出后应立即注入抗凝管，并注意充分摇匀，必要时用竹签绞去试管中可能存在的纤维蛋白后再离心。
2.2 冷凝集素对交叉配血影响9例
这9例主、次侧微柱均出现不同程度的弱凝集，凝集颗粒均匀散布在微柱的上半部分，把这些卡放在37 ℃的孵育器再孵育15 min后离心，凝集有不同程度的减弱。对这9例进行不规则抗体筛查试验，结果均为阴性，而自身对照出现弱阳性。对这些病例测定冷凝集效价，均在1∶512以上，从而证实这9例的交叉配血困难均由于冷凝集素的影响。冷凝集素综合征患者应尽量避免输血，可输可不输者尽量不输，必须输血时，可输入同型的洗涤红细胞，同时，血液制品应在室温放置复温后再输注，输注应缓慢，在输血过程中应密切注意观察[2]。
2.3 自身凝集造成微柱次侧弱凝集34例
这些病例主侧大多为阴性，而次侧均呈现不同程度的弱凝集，凝集颗粒散布在微柱的上半部，而不是在微柱的顶端呈一线状沉淀。其不规则抗体筛查试验均为阴性，自身对照均出现弱阳性，冷凝集素效价均在1∶128以下。此34例有21例是肾脏疾病患者，8例是肿瘤患者，5例是由于各种原因大量多次输血的患者。肾脏疾病患者容易产生自身抗体；肿瘤患者本身易产生高效价的冷凝集素，且红细胞上T、Tn类抗原易暴露，纤维蛋白易升高；反复多次输血的患者由于输注大量异体血液制品而产生红细胞及白细胞抗体。这些抗体易吸附在患者的红细胞上，故主要出现微柱次侧管的凝集。这类患者应尽量减少输血，必须输血时，可输少量浓缩红细胞或洗涤红细胞。
2.4 IgG型抗体引起配血不合4例
该3例微柱主侧出现凝集，仪器判读均为“2+”，抗体筛查试验结果均为阳性，2例抗E，1例抗E，1例抗C，分别给这些患者找到了相合的血液，未出现交叉配血反应。总之，应用微柱凝胶交叉配血试验，对于阳性结果要加以细心观察并熟练进行判定分析，必要时做一些相关的补充试验，比如不规则抗体筛查试验、冷凝集素效价测定试验、自身凝集试验、红细胞放散试验，以保证临床输血的及时性和安全性。
参考文献：
[1]舒象武.应用微柱凝胶抗球蛋白技术进行交叉配血[J].中国现代医学杂志，2003，13(13)：116118.
[2]王静，沈立松，沈霞.冷凝集素综合征引起交叉配血困难1例报告[J].临床输血与检验，2001，3(2)：57.
作者简介：李忠(1972-)，男，湖北钟祥人，1995年毕业于第三军医大学，主管技师。
解放军第一七四医院，福建 厦门 361003, 百拇医药(李忠，吕小英，王厚照)
[关键词] 微柱凝胶；配血不合；交叉配血
准确的交叉配血是临床安全输血的重要保证。以往的盐水配血法只能检测出血清中的完全抗体，微柱凝胶技术可检测出血清中的不完全抗体，有标本用量少、灵敏度高、特异性强、操作简便、结果可长期保存等优点[1]。由于其灵敏度高，因此在配血过程中常出现弱阳性的结果，若不能快速作出准确的判定，则会影响到临床输血的及时性和安全性。我们自2002年10月以来采用微柱凝胶技术配血，现将在使用过程中对遇到的弱阳性结果的判定报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
DianaGel Coombs卡、Diana半自动配血系统(包括加样仪、孵育器、专用离心机、读卡仪、清洗液等)、不规则抗体筛查谱细胞均由Diana公司提供，生理盐水、低离子液由本科自制。
1.2 检测对象
2002年10月至2005年10月在本院需要输血的住院或门诊患者8 454例。
1.3 标本处理
血液标本按以下的要求处理：常规EDTA抗凝血(抗凝剂与血液比例为1∶9)，血液加入试管后注意及时混匀。离心后血浆与血细胞分离清楚，血浆高度至少不小于1.5 cm，不能溶血。
1.4 方法及原理
微柱凝胶中含有一定量的抗人球蛋白，机器自动把患者和献血员的血浆和血细胞按一定比例加入到DianaGel Coombs卡中，经37 ℃的孵育器孵育后(仪器设置时间为15 min)，放在专用离心机离心(时间设置为9 min)。若患者血清中有完全或不完全抗体，完全抗体直接与相对应的血球表面抗原结合发生凝集，而不完全抗体则会致敏在献血员的血球上，再经微柱中的抗人球蛋白的搭桥，便凝集成大的凝集颗粒或结成块状，这些颗粒或块状在离心时无法通过微柱凝胶而留在凝胶的上端,为阳性结果，根椐微柱上面的凝块或微柱凝集颗粒的多少、散布的程度来判定阳性结果，不凝集的血球便完全沉到微柱的底部，为阴性结果。
2 结果与讨论
2.1 纤维蛋白含量过高影响判定结果18例
由于患者血液标本抗凝效果不佳，内含不易察觉的纤维蛋白，出现细胞“凝块”，这种假阳性凝集程度一般较弱，粘附一定量红细胞的纤维蛋白大多聚集在微柱的最上层，但颜色较淡，而大部分红细胞则沉积到微柱的底端，这种情况一般不难判断。因此为了防止血液凝固给实验带来不良影响，患者血液抽出后应立即注入抗凝管，并注意充分摇匀，必要时用竹签绞去试管中可能存在的纤维蛋白后再离心。
2.2 冷凝集素对交叉配血影响9例
这9例主、次侧微柱均出现不同程度的弱凝集，凝集颗粒均匀散布在微柱的上半部分，把这些卡放在37 ℃的孵育器再孵育15 min后离心，凝集有不同程度的减弱。对这9例进行不规则抗体筛查试验，结果均为阴性，而自身对照出现弱阳性。对这些病例测定冷凝集效价，均在1∶512以上，从而证实这9例的交叉配血困难均由于冷凝集素的影响。冷凝集素综合征患者应尽量避免输血，可输可不输者尽量不输，必须输血时，可输入同型的洗涤红细胞，同时，血液制品应在室温放置复温后再输注，输注应缓慢，在输血过程中应密切注意观察[2]。
2.3 自身凝集造成微柱次侧弱凝集34例
这些病例主侧大多为阴性，而次侧均呈现不同程度的弱凝集，凝集颗粒散布在微柱的上半部，而不是在微柱的顶端呈一线状沉淀。其不规则抗体筛查试验均为阴性，自身对照均出现弱阳性，冷凝集素效价均在1∶128以下。此34例有21例是肾脏疾病患者，8例是肿瘤患者，5例是由于各种原因大量多次输血的患者。肾脏疾病患者容易产生自身抗体；肿瘤患者本身易产生高效价的冷凝集素，且红细胞上T、Tn类抗原易暴露，纤维蛋白易升高；反复多次输血的患者由于输注大量异体血液制品而产生红细胞及白细胞抗体。这些抗体易吸附在患者的红细胞上，故主要出现微柱次侧管的凝集。这类患者应尽量减少输血，必须输血时，可输少量浓缩红细胞或洗涤红细胞。
2.4 IgG型抗体引起配血不合4例
该3例微柱主侧出现凝集，仪器判读均为“2+”，抗体筛查试验结果均为阳性，2例抗E，1例抗E，1例抗C，分别给这些患者找到了相合的血液，未出现交叉配血反应。总之，应用微柱凝胶交叉配血试验，对于阳性结果要加以细心观察并熟练进行判定分析，必要时做一些相关的补充试验，比如不规则抗体筛查试验、冷凝集素效价测定试验、自身凝集试验、红细胞放散试验，以保证临床输血的及时性和安全性。
参考文献：
[1]舒象武.应用微柱凝胶抗球蛋白技术进行交叉配血[J].中国现代医学杂志，2003，13(13)：116118.
[2]王静，沈立松，沈霞.冷凝集素综合征引起交叉配血困难1例报告[J].临床输血与检验，2001，3(2)：57.
作者简介：李忠(1972-)，男，湖北钟祥人，1995年毕业于第三军医大学，主管技师。
解放军第一七四医院，福建 厦门 361003, 百拇医药(李忠，吕小英，王厚照)