反向迁移毛细管胶束电动色谱分离测定复方丹参片中5种皂苷的含量
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摘 要 采用反相迁移毛细管胶束电动色谱方法分离测定了复方丹参片中人参皂苷Rd、Rb1、Rg1、Re和三七皂苷R1等5种皂苷的含量。考察了SDS、有机改性剂和磷酸浓度、样品溶剂及进样时间对样品分离和检测灵敏度的影响。最佳缓冲溶液组成为：10 mmol/L磷酸140 mmol/L SDS14% (V/V)乙腈15% (V/V)异丙醇(pH=2.4)，样品溶剂为20%甲醇10 mmol/L SDS，压力进样时间为12 s。在最佳条件下，5种组分在27 min内达到高效分离(柱效为1.1~1.6×106 N/m)，在一个数量级浓度范围内线性相关系数为0.9975~0.9993，日内和日间精密度分别小于4.8%和5.5%，回收率为96.5%~103.6%。该方法用于复方丹参片中皂苷类成分含量的测定，简单、快速、灵敏、准确。关键词 毛细管电泳，反向迁移胶束，复方丹参片，人参皂苷，三七皂苷
1 引 言
复方丹参片由丹参、三七和冰片三味药组成，有活血化瘀、理气止痛之功效，用于心血管疾病可显著扩张冠状动脉，增加血流量，减少心肌耗氧量，改变血液流变性。由于其疗效确切，不良反应少，是临床治疗冠心病、胸闷和心绞痛的常用中成药\[1,2\]。三七中的皂苷类成分是其重要的有效成分。目前，测定复方丹参片中皂苷类成分的方法有HPLC法\[3,4\]和比色法\[5\]。但文献中所采用的HPLC法，样品预处理方法繁琐，而且只测定了人参皂苷Rg1和Rb1\[3\]或三七皂苷R1含量\[4\]；比色法只测定了三七总皂苷含量\[5\]。有些人参皂苷的结构很相似，如人参皂苷Rg1和Re，采用HPLC法分离比较困难，分析时间通常>1 h。由于人参皂苷和三七皂苷成分的紫外吸收为末端吸收，采用低波长检测有利于提高其检测灵敏度，而HPLC法中检测波长一般不能低于203 nm，否则梯度洗脱时基线漂移严重。毛细管电泳具有分离效率高、分析速度快、样品和试剂消耗量少等优点。本研究首次采用反向迁移毛细管胶束电动色谱法同时分离测定了复方丹参片中人参皂苷Rd、Rb1、Rg1、Re和三七皂苷R1的含量 ......
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