芯片毛细管电泳评估脂质体介导超氧化物歧化酶减低细胞内氧化应激
超氧化物歧化酶,脂质体,单细胞,氧化应激,,超氧化物歧化酶,脂质体,单细胞,氧化应激,1引言,2实验部分,3结果与讨论,4结论,References
摘要 超氧化物歧化酶(SOD)可用作抗氧化的药物。它能催化并清除细胞内的活性氧组分(ROS)，保护细胞免受自由基的氧化破坏。但是由于SOD分子量较大，难以透过细胞膜进入细胞内，显著降低了SOD的药效。本研究用激光共聚焦荧光显微镜拍摄的荧光图像说明，纳米脂质体可介导SOD进入细胞。用芯片毛细管电泳激光诱导荧光分析法(MCELIF)测定单细胞中ROS和谷胱甘肽(GSH)的荧光信号强度，评估了用脂质体包裹的SOD与细胞作用的抗氧化效果。用脂质体包裹的SOD与肝癌细胞共培养2 h，与直接用SOD作用于肝癌细胞相比较，细胞内ROS明显降低，GSH明显提高。实验结果说明，用脂质体包裹SOD是一种减低细胞内氧化应激的有效给药途径。关键词 超氧化物歧化酶,脂质体,单细胞,氧化应激
1 引言
在正常状态下，人体内氧化因子和抗氧化因子间处于平衡状态。在代谢过程中，如细胞不能完全清除体内的自由基即可产生氧化应激(oxidative stress)。细胞内活性氧(ROS)和谷胱甘肽(GSH)含量是表征氧化应激高低的重要指标[1]。由于紫外线照射、药物、有毒食物和各种工业污染，使细胞内ROS升高。ROS 包括氢氧自由基 (·OH-)、超氧自由基(·O2-)、过氧羟自由基(·HO2·)和过氧化氢 (H2O2)等组分。ROS过高会产生氧化应激，引起细胞的氧化损伤、凋亡，引发各种自由基疾病并导致衰老[1]。ROS检测方法有顺磁共振法[2]、化学发光法[3]和荧光分光光度法[4]等。但是由于细胞内ROS具有很高的活性，其含量与细胞内的生物环境和pH有关。因此，用这些方法不能得到准确的分析结果[5]。GSH是细胞内主要的含有硫醇基的化合物，它具有强还原性，用于保护细胞内含硫醇的蛋白免遭ROS的氧化。在自由基引发的生理伤害发生时，ROS的含量升高，GSH的含量降低[6]。 GSH可用酶比色法[7]、HPLC[8]和CE[9]等方法检测。超氧化物歧化酶(SOD)是一种广泛存在于生物体内的金属蛋白，它能催化并清除细胞内的超氧自由基，保护细胞免受自由基的氧化破坏 [10]。药用SOD由于其分子量较大，难以透过细胞膜进入细胞内，显著降低了SOD的药效。脂质体(liposome)是通过自组装作用将水相包裹在脂质双分子层中而形成闭合微囊泡[11]。由于脂质体的磷脂膜与细胞膜的结构和成分相似，可以将基因或药物带入细胞内[12]，在生物医学方面得到广泛应用。微流控芯片的微通道适合单细胞样品的引入、控制、反应、分离和检测。近年来，文献[13～16]报道：用2 ......
您现在查看是摘要页，全文长 10321 字符。